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更新時間:2017-11-30
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美國POLYSCIENCES公司成立於(yu) 1961年,主要生產(chan) 和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體(ti) 金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體(ti) 和聚體(ti) 等產(chan) 品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
Polysciences PEI MAX溶液配製說明書(shu)
——線性聚乙烯亞(ya) 胺鹽酸鹽 #24765,1mg/ml轉染試劑的配製
轉染試劑線性PEI MAX溶液的配製
線性聚乙烯亞(ya) 胺鹽酸鹽(Linear Polyethylenimine Hydrochloride)是線性化聚乙烯亞(ya) 胺PEI 25,000的升級產(chan) 品,是一種功能更為(wei) 強大的瞬時轉染試劑。與(yu) PEI 25000的區別在於(yu) :1)*水解(去乙酰化)2)PEI 25000的鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性 3)含更長連續性乙烯亞(ya) 胺片段,其質子化氮水平比PEI25000提高11%以上。
另PEI MAX 40K比PEI 25K更易於(yu) 使用,並且更。PEI 25K轉染溶液通常需要幾個(ge) 小時才能製備,而PEI MAX 40K可以在兩(liang) 個(ge) 小時內(nei) 轉化為(wei) 即用型溶液。而且PEI 25K含有4-11%的殘餘(yu) 丙酰基,可防止聚合物主鏈與(yu) 強烈結合。PEI MAX 40K*去乙酰化的結構意味著每批產(chan) 品的表現始終如一。
下麵將主要介紹polysciences 線性PEI MAX(#24765)的產(chan) 品特性及其溶液的配製過程。
產(chan) 品名稱:轉染級線性聚乙烯亞(ya) 胺鹽酸鹽(PEI MAX)(Linear Polyethylenimine Hydrochloride)
CAS號 | 49553-93-7 | 分子式 | (C2H5N)n ● xHCl | 分子量 | 40000 |
外觀 | 白色或灰白色自由流動固體(ti) | 儲(chu) 存 | 室溫 | 結構式 |
|
溶解性 | 溶於(yu) 低溫和室溫水;不溶於(yu) 常用有機溶劑(乙醇,丙酮,四氫呋喃) | ||||
此指導說明書(shu) 是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的後編寫(xie) 的。下麵推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配製濃度為(wei) 1mg/mL的轉染試劑的配製。
材料:
1g #24765、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、1N氫氧化鈉、25mL無菌塑料吸管、一次性0.1µm, 0.2µm, 0.22µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、pH計、移液器、磁力攪拌棒、帶油管的真空泵
配製過程:
1g #24765——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加1N NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝,4°C保存。
備注:加熱或加酸都有助於(yu) PEI溶解。#24765比#23966易溶,可適當少量加酸,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那麽(me) 低。
轉染液貯存和保存期:
在合適的容器中,轉染溶液在4°C可保持其性能至少6個(ge) 月;對於(yu) 定性工作,此溶液可能適用一年。
Catalog# 24765 – Polyethylenimine HCl MAX, MW 40000, Transfection Grade
Transfection Reagent Preparation (1 mg/mL)
Materials:
1. 1g PEI MAX 40K (Polysciences Catalog# 24765).
2. 1L Milli-Q® water, water for injection (WFI), or comparable biological-grade water
3. 1N Sodium Hydroxide, USP
4. Sterile 25 mL plastic pipette
5. 0.1µm, 0.2µm, or 0.22µm PES vacuum sterile-filter.
6. Sterile HDPE or polypropylene storage vials
Equipment
1. 1L glass beaker
2. PTFE-coated stir bar
3. Magntic stir
4. 1L glass graduated cylinder
5. pH meter
6. Pipette controller
7. Vacuum pump with tubing
Method:
1. In 1L glass beaker, suspend 1g of PEI MAX 40K in 900 mL water.
2. Add PTFE - coated stir bar to 1L glass beaker and set stirring to produce a small vortex.
3. Wait for PEI MAX 40K to compley dissolve. This typically takes less than 5 minutes.
4. Use 25mL palstic pipette t add 1N sodium hydroxide dropwise to 1L glass beaker until pH is 6.90 to 7.10.
5. If pH accidently exceeds 7.10, use 1N hydrochloric acid and a new 25mL plastic pipette to lower pH back to 6.90 to 7.10.
6. Decant solution from 1L glass beaker to 1L graduated cylinder.
7. Add water to 1L graduated cylinder to adjust final volume to 1L
8. Sterile-filter solution through vacuum membrane.
9. Aliquot solution as desired.
10. Store aliquots at 4°C.
Transfection Solution Storage and Shelf Life
At 4°C in a suitable container, the transfection solution will retain its maximum performance for at least six months. For qualitative work, the solution may be suitable for use for up to 1 year.
Support
We’re here to help! Our technical staff can troubleshoot most common and not-so-common issues you
may have. Send us an at info@polysciences.com and we will get back to you, typically within one
business day.
Pre-made Solutions
We offer pre-made solutions of PEI MAX 40K as our Transporter 5TM Transfection Reagent(Catalog#26008). Transport 5TM is 0.1µm sterile-filtered, fully qualified for transfection, and continuously retested to ensure reliably high protein yields.
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