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E M P G E N E T E C H
P r o d u c t S p e c i f i c a t i o n S h e e t
R e c o m b i n a n t H u m a n H E R 2 - E C D
H E R 2 / n e u / E r b B - 2 ( h u m a n e p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r 2 ) i s a m e m b r a n e g l y c o p r o t e i n o f t h e E r b B f a m i l y o f t y r o s i n e k i n a s e r e c e p t o r s . T h e s e p r o t e i n f a m i l y m e m b e r s ( E r b B 1 - 4 ) s e r v e a s r e c e p t o r s f o r e p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r . E r b B 2 i s f o u n d o n t h e s u r f a c e o f e p i t h e l i a l c e l l s a n d i s s t r o n g l y o v e r e x p r e s s e d o n t h e m e m b r a n e o f c a n c e r c e l l s e s p e c i a l l y b r e a s t c a n c e r c e l l s .
E r b B 2 h a s n o i d e n t i f i e d l i g a n d b u t r a t h e r f o r m s h e t e r o d i m e r s w i t h o n e o f t h e o t h e r E r b B r e c e p t o r s . T h e s e c o m p l e x e s a r e o f h i g h a f f i n i t y t o i t s l i g a n d s .
B y b i n d i n g o f t h e l i g a n d a c o n f o r m a t i o n a l c h a n g e o f t h e c y t o p l a s m a t i c t y r o s i n e k i n a s e p a r t o f t h e E r b B 2 r e c e p t o r r e s u l t s i n p h o s p h o r y l a t i o n o f t h e i n i t i a l P I 3 K / A k t s i g n a l t r a n s d u c t i o n c a s c a d e p r o t e i n a n d e f f e c t s c e l l p r o l i f e r a t i o n .
H u m a n E r b B 2 c o n s i s t s o f 1 2 5 5 a m i n o a c i d s ( a a ) w i t h a 2 1 a a l e a d e r s e q u e n c e , a 6 3 1 a a e x t r a c e l l u l a r d o m a i n ( E D ) , a 2 3 a a t r a n s m e m b r a n e r e g i o n , a n d a 5 8 0 a a c y t o p l a s m a t i c d o m a i n .
T h e s o l u b l e E D c a n b e s h e d p r o t e o l y t i c a l l y f r o m t h e c e l l s u r f a c e , i s s t r o n g l y g l y c o s y l a t e d a n d o f a M W o f 9 5 - 1 0 5 k D a .
S o u r c e : - D N A s e q u e n c e f o r h n H E R 2 - E D ( e x t r a c e l l u l a r d o m a i n ) a a T 2 3 - Q 6 4 6
- p r o d u c e d s e r u m f r e e i n s t a b l e H E K 2 9 3 c e l l s
- p u r i f i e d f r o m t h e c u l t u r e s u p e r n a t a n t
P u r i f i c a t i o n : b y a n i o n e x c h a n g e c h r o m a t o g r a p h y
F o r m u l a t i o n : l y o p h i l i z e d f r o m a s o l u t i o n o f 2 0 m m o l T r i s , 2 0 0 m m o l N a C l , p H 7 . 4
C o n c e n t r a t i o n : 1 0 0 0 g / m l
P u r i t y : > 9 5 % n o n r e d u c e d S D S - P A G E
9 5 - 1 0 5 k D a b a n d , p a r t l y d i - a n d t r i m e r i c f o r m s
I d e n t i t y : I m m u n o - B l o t w i t h s p e c i f i c a n t i b o d y
S t a b i l i t y : a t l e a s t 1 2 m o n t h s a t 2 0 0 C , a v o i d r e p e a t e d f r e e z e / t h a w c y c l e s
S i z e s : 1 0 0 g 1 0 0 0 g
C a t . N o : H E R 2 - E C D 1 0 0 H E R 2 - E C D 1 0 0 0
U s a g e : l a b o r a t o r y r e a g e n t - n o t t o b e u s e d a s a d i a g n o s t i c p r o d u c t o r f o r a d m i n i s t r a t i o n t o h u m a n s o r u s e d f o r a n y d r u g p u r p o s e s
R e f e r e n c e s :
1 . C o u s s e n s , L . e t . a l . ( 1 9 8 5 ) S c i e n c e 2 3 0 : 1 1 3 2 .
2 . Y a m a m o t o , T . e t . a l . ( 1 9 8 6 ) N a t u r e 3 1 9 : 2 3 0 .
3 . K a n a i , Y . e t . a l . ( 1 9 9 5 ) B i o c h e m . B i o p h y s . R e s . C o m m u n . 2 0 8 : 1 0 6 7 .
4 . E m k e y , R . a n d C . R . K a h n ( 1 9 9 7 ) J . B i o l . C h e m . 2 7 2 : 3 1 1 7 2 .
5 . S c h a e f e r , G . e t . a l . ( 1 9 9 9 ) J . B i o l . C h e m . 2 7 4 : 8 5 9 .
6 . S c h l e s s i n g e r , J . ( 2 0 0 0 ) C e l l 1 0 3 : 2 1 1
P r o d u c t I n f o r m a t i o n :
T h e p r o t e i n c o n c e n t r a t i o n i s 1 0 0 0 g / m l .
1 . D i s s o l v e i n 1 m l d H 2 O a n d h a n d l e t h e p r o d u c t o n i c e .
2 . O n c e d i s s o l v e d a l i q u o t a n d s t o r e a t - 2 0 o C o r b e l o w .
3 . H a n d l e t h e p r o d u c t c a r e f u l l y t o a v o i d d e g r a d a t i o n .
4 . K e e p t h e w o r k i n g s t e p s l o w t o a v o i d p r o t e i n l o s s e s .
W i t h r e g a r d s ,
D r . F . X . W e l s e r
T V X l n p r j l " $ F H J ~ , . 乙 經 晞 o oo o o oo oo oo oo o )B*ph CJ mH sH PJ ^J aJ OJ QJ CJ mH sH PJ ^J aJ OJ QJ /B*ph CJ mH sH 5PJ ^J aJ \OJ QJ !B*ph mH sH PJ ^J OJ QJ 'B*ph mH sH 5 PJ ^J \ OJ QJ /B*ph CJ mH sH 5 PJ ^J aJ \ OJ QJ )B*ph CJ mH sH PJ ^J aJ OJ QJ +. 0 ( * P f h 0 2 4 J L l |
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