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PhyNexus 蛋白質G PhyTip柱說明書(shu)

Protein G PhyTip Columns

蛋白質G PhyTip柱

蛋白質G PhyTip柱顯示功能性抗體(ti) （IgG）的高結合親(qin) 和力和高選擇性親(qin) 和純化。蛋白G柱顯示出對不同同種型和IgG種類的高選擇性，並獲得高度濃縮的純化蛋白

• 高結合親和力
• 對不同物種的高選擇性和抗體的同種型
• IgG回收率為70-90％

使用我們(men) 專(zhuan) 有的雙流式色譜法  提供的蛋白G提示可  提供完整的抗體(ti) 結合和高終濃度。PhyTip色譜柱兼容大多數8,12和96通道自動化液體(ti) 處理機器人，包括  Agilent Technologies，  Beckman Coulter，  Dynamic Devices，  Perkin Elmer，  Hamilton和  Tecan。

含有蛋白G的PhyTip色譜柱

含有蛋白G的PhyTip色譜柱已經過優(you) 化，可用於(yu) 特定的PhyNexus試劑和儀(yi) 器流速/體(ti) 積，如下所示。使用PhyTip ME 1000和ME 200純化係統收集該信息

所有帶有蛋白G的PhyTip色譜柱都配有推薦的PhyTip緩衝(chong) 液，包括：捕獲緩衝(chong) 液 - 適用於(yu) 需要添加額外緩衝(chong) 液以補充樣品體(ti) 積並確保正確捕獲pH值的情況。洗滌緩衝(chong) 液I - 磷酸鹽緩衝(chong) 溶液pH 7.4洗滌緩衝(chong) 液II - 鹽水溶液。注意：沒有緩衝(chong) 能力以確保有效洗脫富集緩衝(chong) 液 - 用於(yu) 終洗脫步驟 - 磷酸鹽緩衝(chong) 溶液pH 2.5中和緩衝(chong) 液。 - Tris緩衝(chong) 溶液pH 9.0

注意：富集緩衝(chong) 液以4 mL pH 2.5磷酸鹽緩衝(chong) 溶液的形式提供，如果要純化的蛋白質需要較少的酸性洗脫條件，例如pH 2.8，則可以如下更改富集緩衝(chong) 液的pH值：取1 mL標準富集緩衝(chong) 液（pH值） 2.5）加入30μL1MTris Buffer標準中和緩衝(chong) 液，得到1 mL pH 2.8洗脫緩衝(chong) 液（實際pH值可能因體(ti) 積精度而異）對於(yu) pH 3.0濃縮緩衝(chong) 液，取1 mL標準富集緩衝(chong) 液（pH 2.5） ）加入40μL1MTris Buffer標準中和緩衝(chong) 液，得到1 mL pH 3.0洗脫緩衝(chong) 液（實際pH值可能因體(ti) 積精度而異）

對於(yu) 中和步驟，添加25％v / v的洗脫體(ti) 積，例如，如果洗脫體(ti) 積為(wei) 20μL，則添加5μL的1M Tris中和緩衝(chong) 液

含有蛋白G樹脂的200多個(ge) PhyTip色譜柱：

對於(yu) 含有1mg BSA的5μgIgG2a（抗FITC MAb。）的200μL樣品，使用下麵顯示的條件處理，在終樣品體(ti) 積中回收大於(yu) 40％的原始IgG質量。此外，通過用考馬斯檢測的SDS-PAGE測定，回收的IgG純度超過95％。

捕獲：通過樹脂床以250μL/分鍾的流速通過樹脂床捕獲200μL樣品。

純化：200μLPhyNexusProtein G洗滌緩衝(chong) 液I，以500μL/ min的流速通過樹脂床兩(liang) 個(ge) 循環，然後用洗滌緩衝(chong) 液II進行第二次洗滌，在樹脂床上通過兩(liang) 個(ge) 循環流動速率為(wei) 500μL/ min。

富集：用10μLPhyNexusProtein G Enrichment Buffer將蛋白質洗脫到溶液中，以500μL/ min的流速通過樹脂床5個(ge) 循環。用3μLPhyNexus蛋白G中和緩衝(chong) 液中和。

出廠時含有的蛋白G富集緩衝(chong) 液含有：111mM NaH2PO4,140mM NaCl，14.8mM H3PO4，pH3.0

含有蛋白G樹脂的1000多種PhyTip色譜柱：

對於(yu) 含有5μgBSA的10μgIgG2a（抗FITC MAb。）的500μL樣品，使用下麵顯示的條件處理，在終樣品體(ti) 積中回收大於(yu) 40％的原始IgG質量。此外，通過用考馬斯檢測的SDS-PAGE測定，回收的IgG純度超過95％。

捕獲：通過樹脂床以250μL/分鍾的流速通過四個(ge) 循環捕獲500μL樣品。

純化：1000μLPhyNexusProtein G洗滌緩衝(chong) 液I，以500μL/ min的流速通過樹脂床兩(liang) 個(ge) 循環，然後用洗滌緩衝(chong) 液II進行第二次洗滌，以500的流速通過樹脂床兩(liang) 個(ge) 循環。 μL/分鍾。

富集：用15mL PhyNexus Protein G Enrichment Buffer將蛋白質洗脫到溶液中，以500μL/ min的流速通過樹脂床5個(ge) 循環。用5μLPhyNexus蛋白G中和緩衝(chong) 液中和。

PhyTip色譜柱是PhyNexus*的捕獲，純化和富集TM工具，專(zhuan) 為(wei) 微量蛋白質樣品製備而設計。PhyTip色譜柱適用於(yu) 各種液體(ti) 處理平台，並含有特定的親(qin) 和樹脂，可滿足特定應用要求。

PhyNexus建議使用含有IgG的PhyTip入門試劑盒作為(wei) 標準，以驗證所有應用中PhyTip色譜柱的使用。

用於(yu) 純化和富集的樣品必須清澈且無顆粒物質。在與(yu) PhyTip色譜柱一起使用之前，強烈建議離心樣品並僅(jin) 使用澄清的上清液。

運輸和存儲(chu)

每包PhyTip色譜柱均按照高標準生產(chan) 和質量控製，並在保留盒中運輸，以保持每個(ge) PhyTip色譜柱中特定親(qin) 和樹脂的完整性。本產(chan) 品在環境溫度下運輸，但收到後應存放在4到8℃的標準實驗室冰箱中。

• 不要冷凍或儲存冷凍。
• 不使用時，請將盒蓋關閉並密封，存放在冰箱中。
• 在幹燥環境中長時間儲存​​，不要讓親和樹脂幹燥。

含有蛋白G的PhyTip色譜柱在從(cong) PhyNexus發貨時儲(chu) 存在甘油中。

Protein G PhyTip色譜柱可用於(yu) 這些機器人係統。