prozyme PNGase F產(chan) 品
PNGase F，肽-N- 糖苷酶F，肽-N 4 - （N- 乙酰基-β-葡糖胺基）天冬酰胺酰胺酶，通過切割N-聚糖 的內(nei) 部GlcNAc和天冬酰胺（Asn）之間的切割，從(cong) 而獲得完整的N-聚糖。）N-聚糖與(yu) 肽連接的殘基。
通過用熱/ SDS處理使糖蛋白底物預先變性大大提高了N-聚糖去除的速率和可靠性，盡管在較高濃度下酶可以在天然條件下從(cong) 糖蛋白中除去完整的聚糖。使用PNGase F進行快速（5分鍾）去糖基化是我們(men) Gly- X樣品製備平台的一部分。
我們(men) 提供了許多不同的配方和包裝尺寸的PNGase F：
產(chan) 品/包裝尺寸 | 濃度 | 重組 | EDTA |
GKE-5006A （100 mU）， GKE-5006B （200 mU）， GKE-5006D （1 U） | ≥2.5U / ml | ✔ | 1mM的 |
GKE-5016A （100 mU）， GKE-5016B （200 mU）， GKE-5016D （1 U） | ≥2.5U / ml | ✔ | 0 |
GKE-5016B （200 mU）， GKE-5016D （1U） | ≥10U / ml | ✔ | 1 mM |
GKE-5020B （200 mU）， GKE-5020D （1 U） | ≥10U / ml | ✔ | 0 |
GKE-5003 （100 mU） | ≥2.0U / ml |
| 5 mM |
一個(ge) 單位的N-聚糖酶定義(yi) 為(wei) 在pH7.5和37℃下每分鍾催化1μmole變性核糖核酸酶B釋放N-連接寡糖所需的酶量。
緩衝(chong) 劑和變性劑不提供1 U“D”包裝尺寸，但可根據要求提供。
曆*將EDTA包括在天然PNGase F製劑中作為(wei) 穩定劑。對於(yu) GKE-5020配方，我們(men) 重新考慮了這個(ge) 想法，因為(wei) 客戶要求不使用EDTA的PNGase F配方。我們(men) 相信穩定性不如酶的重組形式所關(guan) 注。
尺寸
500個(ge) 單位
選擇目錄號： V4831
PNGase F（肽 N-糖苷酶 F）是一個(ge) 重組糖苷酶，從(cong) Elizabeth-kingia miricola 克隆，並在大腸杆菌中過表達獲得。PNGase F 的分子量為(wei) 36kDa, 可以在 N-連糖蛋白的高甘露糖、雜合和複合寡糖部分內(nei) 側(ce) 的 N- 乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間進行切割（圖1）。PNGase F 不會(hui) 去除常見植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖連接的寡糖。
單位定義(yi) ：一單位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分鍾內(nei) 催化 1nm 變性核糖核酸酶 B（RNase B）去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 單位等於(yu) 1 IUB 毫單位。
分子量：PNGase F 分子量約為(wei) 36kDa 。
物理形態：PNGase F 溶於(yu) 20mM Tris-HCl（pH 7.5，25℃），50mM NaCl和 5mM EDTA緩衝(chong) 液中，濃度為(wei) 10,000u/ml。
應用：
• 蛋白是否被糖基化的特征
• 確定蛋白的糖基化位點
• 聚糖結構特征
• 蛋白運輸
PNGase F對N-聚糖的切割特異性。
重組PNGase F使多種底物去糖基化。
示意圖說明了PNGase F的使用和N-糖基化的質譜分析。
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