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eaglebio 15E39-K01說明書

 更新時間:2019-08-01 點擊量:1046

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eaglebio 15E39-K01說明書(shu)

15-Epi-Lipoxin A4 ELISA Assay Kit

SKU: 15E39-K01

15-Epi-Lipoxin A4 ELISA檢測試劑盒

僅(jin) 供研究使用

大小:1×96 
孔靈敏度:0.02 ng / ml 
動態範圍:0.02 - 20 ng / ml 
孵育時間:2小時
樣品類型:生物流體(ti)
樣品大小:1 mL

產(chan) 品在美國製造

分析背景

15-epi-Lipoxin A4(15-epi-LXA4)是一種阿司匹林引發的類花生酸,據信與(yu) 心髒病,癌症和人類免疫缺陷病毒患者的阿司匹林治療有關(guan) 。在炎症期間,中性粒細胞被激活。15-epi-LXA4,當在體(ti) 內(nei) 給藥時,抑製中性粒細胞活化並抑製炎症(Taka997)。15-epi-LXA4在體(ti) 內(nei) 自然形成。阿司匹林被認為(wei) 參與(yu) 前列腺素G / H合酶的乙酰化,其引發AA轉化為(wei) 15(R)-HETE。該試驗的開發對15-epi-LXA4敏感且具有選擇性,對研究抗炎藥物的研究人員至關(guan) 重要。

 

分析原則

15-Epi-Lipoxin A4 ELISA檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗),用於(yu) 定量分析生物液中的15-epi-Lipoxin A4水平。該測試試劑盒基於(yu) 酶綴合物與(yu) 樣品中的15-epi-LXA4之間的競爭(zheng) 進行操作,用於(yu) 有限數量的抗體(ti) 結合位點。首先將樣品或標準溶液加入微孔板中。接下來,加入稀釋的酶綴合物,搖動混合物並在室溫下溫育1小時。在孵化期間,正在進行結合位點的競爭(zheng) 。然後洗滌板,除去所有未結合的材料。通過添加在30分鍾後產(chan) 生顏色的底物來檢測結合的酶綴合物。定量測試結果可以通過用650nm的酶標儀(yi) 測量和比較樣品孔的吸光度讀數與(yu) 標準品來獲得。顏色發展的程度與(yu) 樣品或標準品中15-epi-LXA4的量成反比。例如,樣品中不存在15-epi-LXA4將產(chan) 生亮藍色,而15-epi-LXA4的存在將導致顏色顯現減少或沒有。

 

  1. 將50μL標準品或樣品(可能需要稀釋)加入到微孔板上的相應孔中,一式兩份。有關樣品板布局,請參見方案I.
  2. 每孔加入50μL稀釋的15-epi-LXA4-HRP結合物。在室溫下孵育一小時。
  3. 每孔用300μL稀釋的洗滌緩衝液洗滌板三次。如果使用自動洗板機,請洗滌5次。
  4. 每孔加入150μLTMB底物。在室溫下孵育30分鍾。
  5. 讀取650 nm的板。

或者,可以通過添加50μL的1N HCl在10-15分鍾後停止顯色反應並在450nm處讀取。

交叉反應數據

15-epi-Lipoxin A 4100.0% 5(S)-HETE<0.01%
脂氧素A 43% 12(S)-HETE<0.01%
15(R)-HETE0.8% 15(S)-HETE<0.01%