genebridges K006說明書

genebridges K006說明書(shu)

Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit

gene bridges快速簡便的大腸杆菌基因刪除試劑盒

細節：

特征

• Red / ET的忠實重組

• 快速

• 可能有多個(ge) 淘汰賽

• 方便地去除重組質粒

應用

該試劑盒旨在在不到一周的時間內(nei) 敲除或改變大腸杆菌染色體(ti) 上的基因。

描述

紅色/ ET重組使堿基對可以，特異性和忠實的方式交換遺傳(chuan) 信息。試劑盒隨附有FRT側(ce) 翼的卡那黴素抗性標記盒，可用於(yu) 替換大腸杆菌染色體(ti) 上的基因。Red / ET重組可替代大腸杆菌染色體(ti) 上長達30kb的片段。如果需要，使用FRT側(ce) 翼抗性盒替代目標基因可以隨後通過FLP重組酶步驟去除選擇標記。FLP表達質粒可以從(cong) Gene Bridges購買(mai) 。重複插入試劑盒隨附的功能盒或與(yu) Gene Bridges提供的其他功能盒組合可產(chan) 生多個(ge) 基因敲除。重組過程由於(yu) pRed / ET表達質粒的優(you) 化設計而受到嚴(yan) 格控製。重組蛋白的基因在誘導型啟動子的控製下，質粒帶有溫度敏感的複製起點，可在重組後方便地除去質粒。

內容

• 兩(liang) 個(ge) Red / ET重組蛋白表達質粒pRed / ET（tet）和pRed / ET（amp）。通過用這些質粒轉化，可將任何大腸杆菌菌株製成Red / ET精通的

• FRT位於(yu) 卡那黴素抗性模板的側(ce) 麵（FRT-PGK-gb2-neo-FRT），可用於(yu) 您自己的實驗。

• 陽性對照，用於(yu) 替換大腸杆菌染色體(ti) 上的甘露糖轉運蛋白（man X）基因。

• 詳細的協議，質粒，圖譜和序列的描述

序列

FRT-PGK-GB2-NEO-FRT

FRT  啟動子neo ^R 終止子   

AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATTCTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTTGTTTTTGTGTGCGGCGCG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTCCTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA