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上海起發現貨PROGEN PRAAV9說明書

 更新時間:2019-10-28 點擊量:1291

上海起發為(wei) PROGEN的中國代理商,PROGEN公司成立於(yu) 1983年,總部位於(yu) 德國海德堡,由海德堡大學教授聯合創辦,是德國一家生物公司,也是德國癌症研究中心的合作夥(huo) 伴。

PROGEN 主要產(chan) 品線:

體(ti) 外診斷領域中細胞生物學和生物醫院學實驗所需要的科研試劑盒抗體(ti) 。

核心產(chan) 品主要為(wei) :K19抗體(ti) 的衍生類產(chan) 品和細胞膠蛋白類抗體(ti) 等。

 

品牌:PROGEN

貨號:PRAAV9

上海起發現貨PROGEN PRAAV9說明書

AAV9 Titration ELISA

*的微量滴定板酶免疫測定法,用於(yu) 定量檢測完整的AAV9 wt病毒體(ti) ,AAV9重組病毒體(ti) 或人腺相關(guan) 病毒9的已裝配和未裝配的空衣殼。捕獲抗體(ti) 檢測到未裝配的衣殼蛋白上不存在的構象表位。 

貨號: PRAAV9 
數量:  96次

詳細1*的微量滴定板酶免疫測定法,用於定量人腺相關病毒9的病毒體和/或組裝的空衣殼。捕獲抗體可檢測未組裝的衣殼蛋白上不存在的構象表位。
詳細2試劑盒對照/標準品:凍幹的AAV9空衣殼
提供表格試劑盒,12 x 8孔試紙
有可能的使用僅供研究使用

 

腺相關(guan) 病毒(AAV)是非致病性的ss病毒,作為(wei) 基因治療的病毒載體(ti) ,正在被廣泛研究。該病毒轉導多種分裂和非分裂細胞,顯示長期基因表達,細胞免疫應答低。AAV已用於(yu) 多項臨(lin) 床試驗(例如FIX,CFTR,帕金森氏病,Canavan病)中,顯示沒有嚴(yan) 重的與(yu) 載體(ti) 相關(guan) 的不良反應。AAV9對於(yu) CNS中的應用特別有用。 

目前用於(yu) 表征AAV製劑的方法包括滴定ELISA,實時PCR,點印跡,轉導單位測定,感染中心測定,SDS-PAGE或電子顯微鏡。

AAV製劑所含的空衣殼比填充的,具有治療活性的病毒顆粒多10倍。由於(yu) 完整顆粒和空顆粒均可誘導免疫反應,因此對於(yu) 體(ti) 內(nei) 應用而言,確定完整的顆粒滴度至關(guan) 重要。

通過PROGEN的AAV9滴定ELISA進行免疫定量分析提供了一種快速,靈敏且可重現的方法,用於(yu) 滴定完整的AAV9 wt病毒體(ti) ,AAV9重組病毒體(ti) 或已組裝且完整的空AAV9衣殼。

ELISA原理:

該測定基於(yu) 夾心ELISA技術,其中將對組裝的AAV衣殼上的構象表位具有特異性的單克隆抗體(ti) (mab)塗在板上,並用於(yu) 從(cong) 樣品中捕獲AAV顆粒。

捕獲的AAV顆粒的檢測過程分為(wei) 兩(liang) 個(ge) 步驟。

  1. 生物素偶聯的單克隆抗體與捕獲的AAV顆粒結合。
  2. 鏈黴親和素過氧化物酶偶聯物與生物素分子反應。底物的添加導致顯色反應,其與特異性結合的病毒顆粒的量成比例。

AAV定量方法的比較:

每種常用的量化方法各有利弊:

  • qPCR已被廣泛使用,但存在一些問題,例如樣品製備,引物設計或PCR效率,這些問題可能導致實驗室間結果之間的高度差異。
  • 數字液滴PCR方法克服了qPCR的某些局限性。但是,由於不同的樣品處理方案,實驗室之間仍然可能發生變化。
  • 如果使用可靠的參考材料,則斑點印跡是一種簡單且定量的方法。然而,它通常受蛋白質印跡的線性和動態範圍的限製。

考慮到上述技術的實際缺陷,目前常規的夾心ELISA在實驗室間和實驗室間的變異以及易於(yu) 使用方麵似乎是*的。因此,它代表了可靠和可再現的總rAVV衣殼滴度定量的宜格式。

改組/變異的AAV的使用:

改組/突變的AAV載體(ti) 的識別取決(jue) 於(yu) 受改組/突變影響的特定衣殼區域。用於(yu) PROGEN的AAV ELISA的捕獲抗體(ti) 結合特異性的(在某些情況下還定義(yi) 為(wei) 良好的構象表位)。這些表位是由相應的AAV血清型的衣殼組件產(chan) 生的。ELISA可能識別您的改組/突變的AAV載體(ti) 的跡象是抗體(ti) 結合表位的存在。然而,衣殼蛋白的蛋白質序列的變化也可能影響蛋白質的構象,因此,AAV衣殼上呈現的表位的構象。這可能會(hui) 影響抗體(ti) 的結合親(qin) 和力,並影響基於(yu) AAV ELISA試劑盒提供的(非改組)試劑盒對照的效價(jia) 測定。由於(yu) 這些屬性在很大程度上取決(jue) 於(yu) 所執行的特定改組/突變,因此PROGEN無法保證對改組/突變的AAV向量進行成功且的定量。即使改組/突變的AAV衣殼上仍存在抗體(ti) 結合表位,也需要針對您的特定AAV載體(ti) 測試和優(you) 化您的檢測方法。

PROGEN強烈建議您生產(chan) 和校準合適的(改組/突變)試劑盒對照品,以確保使用PROGEN ELISA試劑盒可靠地確定滴定的AAV載體(ti) 的滴度。

有限使用標簽許可:僅(jin) 研究使用
產(chan) 品已授權給PROGEN Biotechnik GmbH。這些產(chan) 品用於(yu) 開發,製造和銷售基於(yu) 購買(mai) 的產(chan) 品和/或包括購買(mai) 的產(chan) 品的次級產(chan) 品/衍生物
需要使用基於(yu) 許可的分許可協議。