complementtech R137說明書(shu)

 名稱：因子H蛋白（大鼠）
目錄號：R137
可用規格：100µg/瓶
濃度：1.0 mg/mL（準確濃度見檢驗報告）
形態：液體(ti)
純度：> 90%（SDS-PAGE法）
緩衝(chong) 液：10 mM磷酸鈉，145 mM NaCl，pH 7.3
消光係數A280 nm = 1.682(1.0 mg/mL)
分子量：155000 Da（單鏈）
豁免前：無，0.22µm過濾
儲(chu) 存：-70 ℃
C或以下。避免凍融。
來源：來自健康動物的正常大鼠血清
預防措施：使用常規預防措施處理動物血液製品。
來源：美國生產(chan) 。

Rat Factor H

產品描述

從(cong) 正常大鼠血清中純化大鼠（Rattus Norvegicus）補體(ti) 因子H（fH）。H因子是補體(ti) 替代途徑的重要調控成分。這對於(yu) 防止宿主細胞和組織（尤其是腎髒）的補體(ti) 激活至關(guan) 重要。它具有兩(liang) 個(ge) 功能活性：1）控製替代途徑C3 / C5轉化酶的形成和衰減（衰減加速活性）； 2）作為(wei) I因子的輔因子，當C3b與(yu) H因子結合時，它通過蛋白水解作用使C3b失活（輔助因子活性）。據報道，C3b結合蛋白類似於(yu) 從(cong) 大鼠血漿中分離出的H因子，它是由大鼠血小板產(chan) 生的，並起著免疫粘附受體(ti) 的作用，可清除齧齒動物中的免疫複合物（Alexander JJ等人（2001年））。

一般描述

大鼠（褐家鼠）補體(ti) 因子H(fH)從(cong) 正常大鼠血清中純化而來。因子H是補體(ti) 替代途徑的重要調節成分。它對於(yu) 預防宿主細胞和組織（尤其是腎髒）上的補體(ti) 激活至關(guan) 重要。它具有兩(liang) 種功能活性：1）控製旁路途徑C3/C5轉化酶的形成和衰變（衰變加速活性），和2）作為(wei) 因子I的輔因子，當C3b與(yu) 因子H結合時，其蛋白水解使C3b失活（輔因子活性）。據報道，C3b結合蛋白與(yu) 從(cong) 大鼠血漿中分離的因子H相似，由大鼠血小板產(chan) 生，並作為(wei) 免疫粘附受體(ti) 在齧齒類動物中清除免疫複合物（Alexander J.J. et al.(2001))..(2001)).

因子H是由20個(ge) 同源結構域組成的155000 Da蛋白，在半柔性串上像微珠一樣排列。N端5個(ge) 結構域與(yu) C3b結合並抑製因子b的結合，從(cong) 而減少C3/C5轉化酶的形成。因子H還與(yu) 預形成的C3/C5轉化酶（C3b、Bb和C3b、Bb、C3b）結合，並引起催化亞(ya) 基Bb的快速釋放（衰變加速）。這些活性對於(yu) 控製血漿中替代途徑擴增過程的自發激活至關(guan) 重要。此外，當C3b附著在顆粒表麵時，因子H控製這些酶的形成和衰變。對宿主細胞有效，對外來顆粒效果較差，原因如下。補體(ti) 的替代途徑是通過產(chan) 生液相C3b樣C3(H2O)和C3b的“蜱”不斷激活。因子H可與(yu) 這些蛋白結合並作為(wei) 輔因子，使因子I（一種以活性形式循環的絲(si) 氨酸蛋白酶）可裂解其產(chan) 生無活性蛋白（iC3b或iC3(H2O)）的α鏈。如果C3b不以這種方式失活，它繼續形成C3轉化酶，消耗因子b和C3。如果C3b附著在表麵，則通過因子H和i以相似的方式轉化為(wei) iC3b。當C3b駐留在宿主細胞上時，由於(yu) 因子H識別的宿主標記物的存在，因子H更有效。由於(yu) 因子H識別的宿主特異性識別，補體(ti) 介導的宿主損傷(shang) 小化。

 因子H似乎通過識別宿主標誌物來調節潛在病原體(ti) 與(yu) 宿主細胞和組織之間的區分。連接到表麵的C3b可以啟動替代途徑的擴增級聯。因子H在宿主細胞上阻止了這一點，並使其發生在不帶有宿主樣標記的表麵。這些宿主特異性結構被認為(wei) 是聚陰離子簇，如唾液酸和硫酸化糖胺聚糖。通過位於(yu) 因子H結構域6-20的多個(ge) 多陰離子結合位點識別宿主標誌物。一個(ge) 位點位於(yu) 結構域7，該結構域的突變(Y402H)與(yu) 年齡相關(guan) 性黃斑變性中的補體(ti) 激活和組織破壞密切相關(guan) （Zipfel,P.F. et al.(2006)).一個(ge) 暫定位點位於(yu) 結構域12-14區域，一個(ge) 非常重要的位點位於(yu) 結構域19-20的C-末端。該C-末端位點似乎是幫助結合宿主表麵的主要位點。在遺傳(chuan) 性溶血性尿毒症綜合征中，影響或位於(yu) 這些結構域的突變導致補體(ti) 替代途徑的激活（Zipfel,P.F. et al.(2006)).該位點似乎是參與(yu) 聚陰離子依賴性二聚體(ti) 和因子H四聚體(ti) 形成的位點（Pangburn,M.K. et al.
(2009)).

 物理特性和結構據報道，大鼠因子H的分子量約為(wei) 150,000至155,000道爾頓(Daha MR et al.(1982)；Demberg Tet al.(2002)；Alexander JJ et al.，2001)。大鼠因子H的糖基化水平為(wei) 9.5%（Demberg Tet al.,(2002)。在非還原和還原條件下通過SDS/聚丙烯酰胺凝膠電泳(Invitrogen)對純化的大鼠因子H（目錄號R137）進行分析，結果顯示有一條條帶略微早於(yu) 人因子H（155,000道爾頓）遷移。使用ProtParam，根據其氨基酸序列計算大鼠因子H的消光係數(E1%/280 nm = 16.82)，並假設所有Cys殘基對均形成胱氨酸（即一對半胱氨酸分子通過二硫鍵連接）。根據其氨基酸序列計算的pI為(wei) 6.29。Demberg Tet al.(2002)報告因子H大鼠血清的正常血漿濃度為(wei) 238 + 21 μg/mL，而Daha MR et al(1982)報告為(wei) 244 + 21 μg/mL。

 功能參見上述一般描述。
分析H因子的功能試驗測量其衰變加速活性或I因子輔因子活性(Morgan,B.P.(2000))。已報告了連續監測的熒光測定法(Pangburn,M.K. et al.(1983))，該方法利用存在C3b時ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）的熒光下降約8倍（當C3b轉化為(wei) iC3b時）。因子H的其他功能試驗見人因子H的含量測定章節（目錄號A137）。
使用方便的輔因子測定法（通過SDS凝膠測定純化C3b的裂解）測定純化大鼠因子H（目錄號R137）的輔因子活性。
在存在1µg人因子I（目錄號A138）的情況下，將4 μg(4 μg)大鼠C3b（目錄號R114）與(yu) 不同量的大鼠因子H（目錄號R137，範圍為(wei) 0.1至1µg，總體(ti) 積為(wei) 12µL）共同孵育。將試驗置於(yu) 濕冰上，然後在37 ℃下孵育15 min，此時向試管中加入含還原劑的SDS樣品緩衝(chong) 液，並將樣品加熱5 min。SDS凝膠分析顯示，在 > 0.02 μg大鼠因子H和1 μg人因子I存在的情況下，大鼠C3b的α鏈裂解 > 90%。

 功能在上述一般描述章節中描述了因子H的生物學功能。
遺傳(chuan) 學大鼠因子H染色體(ti) 位置13。大鼠因子H的NCBI基因ID編號為(wei) 155012，UniProt登錄號為(wei) Q91YB6。
預防措施/毒性/危害：該蛋白從(cong) 動物血漿/血清中提純，因此必須采用適用於(yu) 處理任何動物血源性產(chan) 品的預防措施。
危害代碼：B WGK Germany 3MSDS可根據要求提供。
CAS登記號：80295-65-4