qa-bio E-EF01說明書(shu)
Endo F1從(cong) 肽和蛋白質中裂解出高甘露糖和一些雜合型N-聚糖
部件號–酶量
E-EF01 – 60 µLs¹
E-EF01-20 – 20 µls¹
E-EF01-200 – 200 µls²¹
含緩衝(chong) 液
²僅(jin) 含酶
內(nei) 切F1,內(nei) 切糖苷酶F1,內(nei) -β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶F
Endo F1裂解天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖。核心岩藻糖基化將活性降低了50倍。糖苷內(nei) 切酶F1將水解含有高甘露糖鏈的硫酸鹽。其在寡糖的二乙酰基殼二糖核心中的兩(liang) 個(ge) N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解,產(chan) 生截短的糖分子,其中一個(ge) N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。
附加遠藤˚F產(chan) 品
內(nei) 切糖苷酶F2釋放雙觸角和高甘露糖聚糖(以40X減小的速率)
內(nei) 切糖苷酶F3將釋放triantennarry和岩藻糖基雙觸角N-聚糖
的遠藤˚F多套件包括每個(ge) 遠藤˚F酶和它們(men) 的緩衝(chong) 器中的20個(ge) μLs。
源重組Elizabethkingia miricola(是腦膜膿毒性金黃)在大腸杆菌
EC 3.2.1.96
內(nei) 切F1特異性裂解所有與(yu) 天冬酰胺連接的高甘露糖和一些雜合寡糖
內(nei) 容
在20mM的Tris-HCl 60酶微升等分試樣(1 U),pH 7.5中
隨附20 µL和60 µL的包裝尺寸:
5倍反應緩衝(chong) 液– 250 mM磷酸鈉,pH 5.5
比活度> 16 U / mg
活度> 17 U / ml
分子量32,000道爾頓
建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體(ti) 積調整為(wei) 38 µl。
2.添加10 µl 5x反應緩衝(chong) 液5.5。3
.添加2.0 µl Endo F1。在37°C下孵育1小時。
比活性
定義(yi) 為(wei) 在37°C,pH 5.5下,在1分鍾內(nei) 催化1微摩爾變性核糖核酸酶B(RNase B)釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監測切割(切割的RNase B遷移更快)。
儲(chu) 存將酶保存在4˚C下。
穩定性正確存放後至少可穩定12個(ge) 月。幾天暴露於(yu) 環境溫度不會(hui) 降低活性。
純度如下測試內(nei) 切糖苷酶F1對蛋白酶的汙染。將10μg變性的BSA與(yu) 2μL酶在37oC下孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產(chan) 宿主菌株已經過廣泛測試,不會(hui) 產(chan) 生任何可檢測的糖苷酶。
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