qa-bio E-EF01-20說明書(shu)
E-EF01-20
從(cong) 肽和蛋白質中選擇性釋放雙觸角聚糖
查看產(chan) 品文檔:
Specsheet CoA SDS
部件號–酶量
E-EF02 – 60 µLs¹
E-EF02-20 – 20 µls¹
E-EF02-200 – 200 µls²¹
含緩衝(chong) 液
²僅(jin) 含酶
內(nei) 切F2,內(nei) 切糖苷酶F2,內(nei) 切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶F2
Endo F2從(cong) 糖蛋白上裂解N聯(天冬酰胺連接)雙觸角寡糖。它還可以切割高甘露糖聚糖,但切割速率降低40倍。其在寡糖的二乙酰基殼二糖核心中的兩(liang) 個(ge) N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解,產(chan) 生截短的糖分子,其中一個(ge) N-乙酰氨基葡糖殘基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。
內(nei) 切糖苷酶F2對蛋白質構象的敏感性低於(yu) PNGase F,因此更適合天然蛋白質的去糖基化。但是,為(wei) 獲得最佳結果,建議糖蛋白變性。
附加遠藤˚F產(chan) 品
內(nei) 切糖苷酶F1釋放bianatennary和一些混合聚糖
內(nei) 切糖苷酶F3將釋放triantennarry和岩藻糖基雙觸角N-聚糖
的遠藤˚F多套件包括每個(ge) 遠藤˚F酶及其緩衝(chong) 器的20個(ge) μLs。
源重組Elizabethkingia miricola(是腦膜膿毒性金黃)在大腸杆菌
EC 3.2.1.96
特異性
從(cong) 肽和蛋白質中裂解所有天冬酰胺連接的雙觸角寡糖和高甘露糖(盡管降低了40倍)
內(nei) 容
60的酶微升等分試樣(0.3 U)在10mM乙酸鈉的25mM NaCl,pH為(wei) 4.5
包括20 µL和60 µL的包裝尺寸:
5x反應緩衝(chong) 液– 250 mM乙酸鈉,pH 4.5
比活度> 20 U / mg
活度> 5 U / ml
分子量32,000道爾頓
建議用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去離子水將最終體(ti) 積調整為(wei) 38 µl。
2.添加10 µl 5x反應緩衝(chong) 液4.5。3
.添加2.0 µl Endo F2。在37°C下孵育1小時。
比活性
定義(yi) 為(wei) 在37°C,pH 5.5下1分鍾內(nei) 催化1微摩爾變性豬纖維蛋白原釋放N-連接寡糖所需的酶量。通過SDS-PAGE監測裂解(裂解的纖維蛋白原遷移更快)。
儲(chu) 存將酶保存在4˚C下。
穩定性正確存放後至少可穩定12個(ge) 月。幾天暴露於(yu) 環境溫度不會(hui) 降低活性。
純度如下測試內(nei) 切糖苷酶F2對蛋白酶的汙染。將10μg變性的BSA與(yu) 2μL酶在37oC下孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析未顯示降解跡象。
生產(chan) 宿主菌株已經過廣泛測試,不會(hui) 產(chan) 生任何可檢測的糖苷酶。
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