zymoresearch D4004說明書(shu)

Clean & Concentrator-5

亮點

清潔並濃縮高達5微克的≥ 用0µl洗滌殘渣在2分鍾內(nei) 洗脫6µl。

柱設計允許以高濃度洗脫到最小體(ti) 積的水或TE緩衝(chong) 液中。

洗脫非常適合用於(yu) PCR、測序、連接、核酸內(nei) 切酶消化、RNA轉錄、放射性標記、陣列等。

描述

Clean&Concentrator-5是一種PCR純化試劑盒，可從(cong) PCR、核酸內(nei) 切酶消化、修飾反應、同位素/熒光標記反應等中純化高達5µg的。該產(chan) 品有助於(yu) 去除聚合酶、修飾酶、RNA聚合酶、連接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、，和限製性內(nei) 切酶，以及遊離dNTPs及其類似物，包括放射性標記和熒光衍生物。洗脫適用於(yu) PCR、陣列、連接、測序等。

耐洗滌劑性≤5%Triton X-100，≤5%吐溫-20，≤5%沙可西，≤0.1%十二烷基硫酸鈉

洗脫體(ti) 積≥ 6微升

設備微量離心機

純度A260/A280>1.8

來自PCR、核酸內(nei) 切酶消化、修飾反應、同位素/熒光標記反應等的樣本源。

大小範圍為(wei) 50 bp至23 kb

產(chan) 量≤ 可回收5微克總。對於(yu) 50bp至10kb的，回收率為(wei) 70-95%。對於(yu) 11kb到23kb的，回收率為(wei) 50-70%。

問題1：有上限和無上限有什麽(me) 區別？

區別是帽子。列之間的所有其他內(nei) 容（最大容量、列矩陣等）都是相同的。不確定使用哪一個(ge) ？這主要取決(jue) 於(yu) 偏好。有些人喜歡有蓋的色譜柱，以便於(yu) 標記或增加安全性，而另一些人喜歡無蓋色譜柱，以加快樣品處理。

問題2：樣本的最小輸入量是多少？

使用低於(yu) 50µl的體(ti) 積可能會(hui) 導致回收率降低。Zymo研究建議用水將起始體(ti) 積提高到100µl，以確保最佳結合條件。

問題3：可以重新加載多少次列？

Zymo Research建議重新加載色譜柱不超過5次，因為(wei) 綁定效率可能會(hui) 降低。

問題4：如果柱上裝載的超過規定的最大結合容量，會(hui) 發生什麽(me) 情況？

由於(yu) 矽膠基質堵塞，色譜柱過飽和可能導致總損失。

問題5：如何處理儲(chu) 存在/RNA的裸？

向樣品中加入等量的乙醇（95-100%），並充分混合。樣品已準備好結合，不需要結合緩衝(chong) 液。繼續執行步驟2。

問題6：可以回收的的下限和最小量是多少？

皮克級的可以恢複。該限製基於(yu) 檢測方法的靈敏度。

問題7：如果在開始之前沒有向清洗緩衝(chong) 液中添加乙醇，我該怎麽(me) 辦？

在清洗步驟中，將從(cong) 柱上洗脫。使用適當量的結合緩衝(chong) 液重新綁定樣本，並使用適當製備的洗滌緩衝(chong) 液清洗柱。