TintoFast Synaptophysin Antibody 對冷凍丙酮固定的 Merkel 細胞癌細胞組織的免疫組織化學分析
有可能的使用 | 用於莫氏體外診斷 | |||||||||||||||||||||||||||
總結與說明 | 突觸素是一種重 38 kDa 的突觸小泡糖蛋白。它存在於(yu) 內(nei) 分泌細胞、大腦、脊髓和腎上腺中。它作為(wei) 神經內(nei) 分泌細胞的標誌物。突觸素與(yu) 人腎上腺髓質、頸動脈體(ti) 、皮膚、垂體(ti) 、甲狀腺、肺、胰腺和胃腸粘膜的神經內(nei) 分泌細胞發生反應。在腦神經元、脊髓、視網膜和胃腸道的潘氏細胞和胃壁細胞中可見陽性染色。 TintoFast Synaptophysin 抗體(ti) 可識別正常的神經內(nei) 分泌細胞和神經內(nei) 分泌腫瘤。觀察到彌漫性細顆粒細胞質染色,這可能與(yu) 神經分泌囊泡內(nei) 的抗原分布有關(guan) 。Synaptophysin 的表達與(yu) NSE 或其他神經內(nei) 分泌標誌物的存在無關(guan) 。突觸素是神經和神經內(nei) 分泌分化的獨立廣泛標誌物。 | |||||||||||||||||||||||||||
抗體類型 | 兔多克隆 | 克隆 | 多克隆 | |||||||||||||||||||||||||
同型 | IgG | 反應性 | 石蠟,冷凍 | |||||||||||||||||||||||||
本土化 | 細胞質 | 控製 | 胰腺、大腦、垂體、腎上腺、結腸 | |||||||||||||||||||||||||
介紹 | TintoFast Synaptophysin 是一種兔多克隆抗體,來源於細胞培養上清液,經過濃縮、透析、過濾滅菌並在 pH 7.5 的緩衝液中稀釋,其中含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。 | |||||||||||||||||||||||||||
可用性 |
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莫氏冷凍組織的標本製備
將標本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nei) 。
在 4-5 µm 處切割切片並安裝在帶正電的載玻片上,例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。
在室溫下風幹載玻片 2 分鍾,然後在培養(yang) 箱或幹浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鍾。
在室溫下用丙酮固定 2 分鍾,然後讓載玻片風幹。
莫氏冷凍組織的預處理
將 TintoDetector 培養(yang) 箱預熱至 110 °C。
將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 麵對麵放置,然後將它們(men) 插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。
將載玻片浸入含 EDTA 的 Immuno Retriever 中,通過毛細作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。
在預熱的 TintoDetector 培養(yang) 箱中加熱載玻片 3 分鍾。
將載玻片轉移至室溫並冷卻 1 分鍾。
莫氏 IHC 檢測
HIER 後,將載玻片轉移到 Immuno 清洗機,靜置 1-2 分鍾。
對於(yu) 手動染色,在環境溫度下進行抗體(ti) 孵育。對於(yu) 自動染色方法,請根據儀(yi) 器製造商的說明進行抗體(ti) 孵育。
用 Immuno 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續 IHC 檢測協議。用 Immuno 洗滌液在每個(ge) 步驟之間清洗載玻片。
HRP Green 免疫組化方案的縮寫(xie) Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown
與(yu) 一抗孵育 5 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
用 M/R 鏈接孵育 4 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
HRP 標簽 4 分鍾。
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
準備
DAB Brown(在 1ml DAB 緩衝(chong) 液中加入 1 滴 DAB Chromogen;充分混合)
或 HRP Green(在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen;充分混合)
用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鍾
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
用蘇木精或核固紅複染 30 秒
用緩衝(chong) 液(TBST 或 PBST)清洗
使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水,然後使用 PermaMounter 安裝
步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鍾協議 |
希爾 | 3 分鍾。 |
一抗 | 5分鍾。 |
第一步檢測 | 4分鍾。 |
第二步檢測 | 4分鍾。 |
底物色原 | 1-2 分鍾。 |
複染/蓋玻片 | 變化 |
此協議也可用於(yu) 使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。
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