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​biosesb BSB-3771-3說明書

　更新時間：2022-04-06　點擊量：710

 

biosesb BSB-3771-3說明書(shu)

 

TintoFast Ki-67 (RM360), RMab

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TintoFast Ki-67 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue

 

 

可能的使用 用於莫氏體外診斷
 
總結與說明

Ki-67 蛋白是增殖的細胞標誌物。它與(yu) 細胞增殖密切相關(guan) 。在間期，Ki-67 抗原隻能在細胞核內(nei) 檢測到，而在有絲(si) 分裂中，大部分蛋白質被重新定位到染色體(ti) 表麵。Ki-67 蛋白存在於(yu) 細胞周期的所有活動階段（G1、S、G2 和有絲(si) 分裂），但在靜息細胞 (G0) 中不存在。

TintoFast Ki-67 抗體(ti) 是確定給定細胞群生長分數的標記。Ki-67 陽性腫瘤細胞的比例（Ki-67 標記指數）通常與(yu) 癌症的臨(lin) 床病程相關(guan) 。在這方麵研究得好的例子是前列腺癌和乳腺癌。
  抗體類型 兔單克隆 克隆 RM360
  同型 IgG 反應性 石蠟，冷凍
  本土化 核 控製 睾丸，扁桃體，骨髓，胎盤，結腸，。扁桃體、輸卵管、星形細胞瘤、乳腺癌、結腸癌
 
介紹 TintoFast Ki-67 是一種兔單克隆抗體，來源於細胞培養上清液，經過濃縮、透析、過濾滅菌和稀釋在 pH 7.5 的緩衝液中，含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。
 
可用性
目錄號 抗體類型 稀釋 數量/數量
BSB-3771-3 TintoFast 預稀釋 可以使用 3.0 毫升
BSB-3771-7 TintoFast 預稀釋 可以使用 7.0 毫升
BSB-3771-15 TintoFast 預稀釋 可以使用 15.0 毫升
       
       
   

Mohs IHC 程序

莫氏冷凍組織的標本製備

  1. 將標本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nei) 。

  2. 在 4-5 µm 處切割切片並安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。

  3. 在室溫下風幹載玻片 2 分鍾，然後在培養(yang) 箱或幹浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鍾。

  4. 在室溫下用丙酮固定 2 分鍾，然後讓載玻片風幹。

莫氏冷凍組織的預處理

  1. 將 TintoDetector 培養(yang) 箱預熱至 110 °C。

  2. 將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 麵對麵放置，然後將它們(men) 插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。

  3. 將載玻片浸入含 EDTA 的 Immuno Retriever 中，通過毛細作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。

  4. 在預熱的 TintoDetector 培養(yang) 箱中加熱載玻片 3 分鍾。

  5. 將載玻片轉移至室溫並冷卻 1 分鍾。

莫氏 IHC 檢測

  1. HIER 後，將載玻片轉移到 Immuno 清洗機，靜置 1-2 分鍾。

  2. 對於(yu) 手動染色，在環境溫度下進行抗體(ti) 孵育。對於(yu) 自動染色方法，請根據儀(yi) 器製造商的說明進行抗體(ti) 孵育。

  3. 用 Immuno 洗滌器或去離子水清洗載玻片。

  4. 繼續 IHC 檢測協議。用 Immuno 洗滌液在每個(ge) 步驟之間清洗載玻片。

HRP Green 免疫組化方案的縮寫(xie) Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown

  1. 與(yu) 一抗孵育 5 分鍾

  2. 用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗

  3. 用 M/R 鏈接孵育 4 分鍾

  4. 用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗

  5. HRP 標簽 4 分鍾。

  6. 用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗

  7. 準備

    • DAB Brown（在 1ml DAB 緩衝(chong) 液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）

    • 或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）

  8. 用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鍾

  9. 用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗

  10. 用蘇木精或核固紅複染 30 秒

  11. 用緩衝(chong) 液（TBST 或 PBST）清洗

  12. 使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水，然後使用 PermaMounter 安裝

步 Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鍾協議
希爾 3 分鍾。
一抗 5分鍾。
第一步檢測 4分鍾。
第二步檢測 4分鍾。
底物色原 1-2 分鍾。
複染/蓋玻片 變化

此協議也可用於(yu) 使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。