cellabs 02-019-01說明書(shu)
cellabs代理——上海起發
免疫檢測試劑盒
包涵體(ti) 肝炎的反應
5 x 96井測試套件
儲(chu) 存在2-8攝氏度
目錄
5 x 96孔FAdv-8抗原塗層微孔板
1 x 100mL瓶ELISA稀釋液濃縮液10x(藍色
解決(jue) 方案)
7 x 0.08mL標準瓶(平蓋)
1 x 0.3mL小瓶抗雞HRP結合物(藍帽)
1瓶250mL洗滌緩衝(chong) 液濃縮液(20x)
1 x 3.0mL基質濃縮物(20x)
1 x 60mL基質緩衝(chong) 液
1 x 30mL停止溶液
方法
準備所有步驟均在室溫下進行。
使用前,確保微量滴定板和所有試劑處於(yu) 室溫。
以下所示數量是指使用一塊板所需的數量。
為(wei) 了製備ELISA稀釋液,將15 ml濃縮物添加到135 ml蒸餾水中。
為(wei) 了製備洗滌緩衝(chong) 液,稀釋25mL或從(cong) x20分配瓶中分配一份溶液到500 ml洗滌瓶中,並用蒸餾水填充至刻度。
平板布局:平板上有足夠的空間放置80個(ge) 測試樣品(每個(ge) 孔一個(ge) 樣品),兩(liang) 行放置7個(ge) 標準血清樣品(一式兩(liang) 份)。請參考建議的標準板布局。
1、樣品稀釋:將10uL樣品加入1mL ELISA稀釋液(1x)中,以1:100的比例稀釋測試樣品和每個(ge) 標準血清。混合均勻。預稀釋的標準品和樣品可在4℃下儲(chu) 存兩(liang) 周。
2、樣品添加。向孔中加入50uL每個(ge) 稀釋樣品。添加50uL各稀釋標準血清。通過添加50uL ELISA稀釋液(1x)包括空白孔。建議的平板布局如圖1所示。標準1為(wei) 非反應器(陰性對照),標準7為(wei) 高滴定度樣品(陽性對照)。
培養(yang) 板在室溫下在潮濕容器中培養(yang) 1小時。
4、清洗板使用1x清洗緩衝(chong) 液清洗板三次。如果不使用自動洗板機,輕彈盤子清空內(nei) 容物,並立即使用清洗瓶清洗水井三次。輕拍幹燥實驗室紙巾,去除殘留物。
5、共軛物的稀釋和添加。
將50uL結合物加入6mL ELISA稀釋液(1x),以1:120的比例稀釋結合物。混合均勻。向每個(ge) 孔中添加50uL稀釋共軛物。
6.按照步驟3進行孵化。
7.按照步驟4清洗盤子。
8.TMB基板的添加。
通過將0.6 mL濃縮物添加到11.4 mL基質緩衝(chong) 液(足以容納1個(ge) 平板)中來稀釋基質濃縮物。混合均勻。向每個(ge) 孔中添加100uL基質。
9、顯色。
室溫下在黑暗中培養(yang) 15分鍾。
10、停止反應。向每口井中加入50uL停止溶液。
11、閱讀
在450 nm的單波長或450/620nm的雙波長下讀取條帶。
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