HA Tag CUTANA™ CUT&RUN Antibody
產(chan) 品概述
類型：多克隆
主機：兔
目標大小：不適用
格式：親(qin) 和純化 IgG
反應：HA表位（YPYDVPDYA）
應用：切割和運行，WB
HA 抗體(ti) （0.5 μg） 和 500，000 個(ge) MDA-MB-231 細胞穩定表達 c 端 3xHA 標記的 GATA3 [1]*.使用MACS2調用峰值。（一）顯示GATA3-3xHA峰的熱圖 相對於(yu) IgG 和 H3K4me3 對照抗體(ti) （分別為(wei) EpiCypher 13-0042 和13-0041），按強度排列（頂部至 底部）並著色，紅色表示高度本地化 富集和藍色表示背景信號。（二）GATA3-3xHA峰值的數量 屬於(yu) 功能注釋基因組的不同類別 繪製區域。
A）荷馬分析中的分析確定 GATA3 共識主題，表示為(wei) 序列徽標 位置權重矩陣，在GATA3-3xHA下富集 切割和運行峰值。（二）GATA3-3xHA的數量 含有來自圖A的GATA3共識基序的峰是 由維恩圖表示。（中四）二 代表性位點顯示GATA3-3xHA峰與(yu) 下麵提到的共識主題（IGV）。
（A）一組重組核小體(ti) 創建其中各種表位標簽（3xTY1，3xFLAG，3xHA） 融合到組蛋白H3尾部。融合的核小體(ti) 和 將未修飾的對照固定在鏈黴親(qin) 和素珠上 （SA Bead）並與(yu) ConA一起加標到CUT&RUN樣品中 磁珠固定3xHA MDA-MB-231細胞（圖1）。高可用性標簽 然後加入抗體(ti) 和pAG-MNase（EpiCypher15-1016）以釋放抗體(ti) 結合的核小體(ti) 通過pAG-MNase介導的裂解進入溶液 接頭（淺藍色）。這種方法提供了一個(ge) 定義(yi) 的 實驗對照以評估HA Tag抗體(ti) 是否 選擇性切割具有高特異性的靶表位 和最小的背景。（二）CUT&RUN序列讀數與(yu) 獨te的比對 “條形碼"對應於(yu) 刺入中的每個(ge) 核小體(ti) 麵板。數據表示為(wei) 恢複的讀取百分比 相對於(yu) 預期目標（3xHA，設置為(wei) 100%）。這 分析證實HA標簽抗體(ti) 特異性 將靶表位標記的核小體(ti) 釋放到 溶液。
多標簽融合蛋白的大腸杆菌細胞蛋白 用於(yu) 製備全細胞裂解物。指示的 將一定量（ng）的裂解物上樣到4-20%SDS-PAGE凝膠上 並在標準蛋白質印跡條件下使用 HA 進行分析 標記抗體(ti) （1：25，000）。
免疫原
合成的HA肽（序列：YPYDVPDYA）。
配方
磷酸鹽中的抗原親(qin) 和純化抗體(ti) （1.0 mg/mL） 緩衝(chong) 鹽水（PBS），0.09%sodium azide。
儲(chu) 存和穩定性
自收到之日起在 4°C 下穩定保存 1 年。
推薦稀釋度：
切割和運行：0.5 微克
蛋白質印跡 （WB）：1：1，000 - 1：30，000
背景參考文獻：
[1] Takakuet al.基因組生物學.（2016）. PMID：26922637
*感謝 Takaku 博士 （UND） 的 3xFlag-GATA3-3xHA MDA-MB-231 細胞。
產(chan) 品詳情
名稱 HA Tag CUTANA™ CUT&RUN Antibody
編號 13-2010
品牌 epicypher
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