ComplementTech C3 Protein說明書

名稱： C3蛋白

編號： A113

規格： 250 µg/vial

濃度： 1.0 mg/mL (實際濃度見分析證書(shu) )

類型 冷凍液體(ti)

活動： >值為(wei) 70%，與(yu) 正常人血清標準相比 (見分析證書(shu) ) 。

純度： >95%由SDS-PAGE

緩衝(chong) 區： 10 mM磷酸鈉，145 mM氯化鈉，pH 7.2

消缺係數。 A280 nm在1.0 mg/mL時的=為(wei) 1.03

分子量： 185000Da (2鏈)

防腐劑： 無，0.22µm過濾

存儲(chu) ： - 7 0oC或以下。避免凍融 (>每次解凍活性損失10%) 。

根源 正常的人類血清 (經認證的HBsAg、HTLV-I/II、STS和HCV、 HIV1和HIV-II抗體(ti) 檢測均為(wei) 陰性) 。

預防措施 在處理人體(ti) 血液製品時要采取常規的預防措施。

一般說明

人類天然的C3是一種天然的糖基化 (~2.7%) 多肽，包含兩(liang) 條二硫鍵連接的鏈 。C3是補體(ti) 激活的所有三種途徑的激活的核心(Law，S。K.A.和裏德，K。B. M. (1995)).每個(ge) 途徑的起始都產(chan) 生與(yu) 目標表麵結合的蛋白水解酶複合物 (C3轉化酶 ) 。這些酶在C3中切割一個(ge) 肽鍵，釋放過敏性毒素C3a並激活C3b。在很短的一段時間 內(nei)  (~60µs) ，這種新生的C3b能夠與(yu) 目標表麵的羥基發生反應並共價(jia) 偶聯。碳水化合 物是shou選的目標，但蛋白質的羥基和氨基也會(hui) 發生反應。這種用C3b標記目標表麵的過 程被稱為(wei) 調理作用。新生C3b的反應位點是硫酯(Tack B。J.等人。 (1980); Pangburn M.K.和穆勒-EberhardH。J. (1980) )，C3b通過共價(jia) 酯鍵與(yu) 目標相連 (如果C3b附著在 氨基上，則形成酰胺鍵) 。大多數在補體(ti) 激活過程中被激活的C3永遠不會(hui) 附著在表麵 ，因為(wei) 它的硫酯與(yu) 形成水的流體(ti) 相C3b反應，而C3b被H和形成iC3b的因子迅速失活。表 麵結合的C3b在所有三個(ge) 途徑中對於(yu) 有效激活C5和C5b-9複合物的形成都是必需的。表 麵結合的C3b及其分解產(chan) 物iC3b和C3d被淋巴細胞和吞噬細胞上的許多受體(ti) 識別，這些 受體(ti) 使用C3b配體(ti) 刺激抗原呈遞給適應性免疫係統的細胞。最終的結果是目標特異性b 細胞和t細胞群體(ti) 的擴大。

物理特性和結構

分子量：18.5萬(wan) 道爾頓， 由兩(liang) 條二硫鍵連接的鏈組成。阿爾法鏈是110000道爾 頓 (包含C3a和C3d域) ，測試鏈是75000道爾頓。阿爾法鏈和阿爾法鏈是通過一個(ge) 二硫 鍵連接起來的。C3的pI約為(wei) 。5.9

C3被C3轉化酶切割後，C3a (77個(ge) 氨基酸片段，9083 Da) 從(cong) alpha鏈的n端釋 放出來，C3b (176,000 Da) 變成共價(jia) 附著在活化劑表麵的。C3和C3b的晶體(ti) 衍生結構均已被描述(Gros，P。 (2008) ) ，這些結果表明，在C3a- C3b肽鍵被裂解後，C3的C3b部分發生了很大的構象變化。

天然的C3和C4在血漿中循環，通過分子內(nei) 硫酯鍵連接其C3d或C4d結構域中的 甘氨酸和穀氨酰胺殘基。這些硫酯鍵容易受到氨、 甲胺、羥胺和聯胺等氨的親(qin) 零攻擊 ，所有這些胺都已被用於(yu) 滅活補體(ti) 。

功能

C3對於(yu) 有效的補體(ti) 激活和隨後的抗原呈現給適應性免疫係統的細胞至關(guan) 重要 (Lambris，J。D. (1988)).在識別目標補體(ti) 後，被三種補體(ti) 途徑中的一種激活，並在 目標表麵形成酶 (C3轉化酶) 。這些酶 (C4b、C2a或C3b、Bb) 在阿爾法鏈的Arg 77後 切割C3，釋放過敏性毒素C3a並將C3b沉積在目標表麵。雖然有一個(ge) 非常弱的C3旁路係 統通過經典和凝集素途徑運作 (C4b，C2a可以在沒有C3b的情況下激活C3b的102000) ，C3b是有效C5激活所必需的(Rawal N。和潘伯恩M。K. (2003)).純化的c3對凍融極為(wei) 敏感，在每個(ge) 凍融循環中損失510%的活性。它對諸如-20 等中間溫度也很敏感oC.它在中等溫度下停留的時間越長，失去的活性就越多。幾個(ge)  小時oC可以wan全滅活它，即使它仍然被wan全凍結。