牛血清白蛋白是細胞培養中常用的培養基添加劑,它含有豐富的生長因子、細胞因子和營養物質,可以提供細胞所需的全部生長條件。本文將著重闡述來源、成分、製備方法以及其在細胞培養中的應用。
一、來源
牛血清白蛋白是從未出生的牛胚胎中采集而來的。采集過程中,需要保證采集源的衛生狀況,不受任何感染。通常情況下,選擇3個月以內的母牛,采取無痛取卵的方式,得到胚胎後將其移植到營養液或者小鼠肚皮腔中進行孵化,最後收集得到所需的胎牛血清。
二、成分
主要由以下幾種成分組成:
1.生長因子和細胞因子:包括表皮生長因子、成纖維細胞生長因子等,可以促進細胞增殖和分化;
2.營養物質:包括葡萄糖、氨基酸、脂肪酸、維生素等,可以提供細胞所需的能量和營養;
3.血清蛋白:包括白蛋白、球蛋白等,可以幫助細胞吸附和擴散;
4.激素:包括胰島素、睾酮、雌激素等,可以調節細胞代謝和功能;
5.礦物元素:包括鈣、鎂、鐵等,可以維持細胞內外環境的平衡。
三、製備方法
製備需要經過以下幾個步驟:
1.采集胚胎:選取無病毒、無菌的母牛進行取卵操作,得到胚胎後移植到營養液或小鼠肚皮腔中培育;
2.收集血清:在胚胎發育到一定階段後,將其宰殺,收集胎兒心髒中的血液,並通過離心、過濾等步驟去除雜質,得到胎牛血清;
3.加工處理:將胎牛血清進行加熱滅菌、冷凍保存等處理,最後經過各項檢測確保其無菌、無毒性,可供細胞培養使用。
四、在細胞培養中的應用
1.細胞培養基補充劑:FBS可以作為細胞培養基中的補充劑,提供細胞所需的營養物質和生長因子,並保持細胞在體外的生理狀態,促進細胞生長和分化。
2.凍存液製備:FBS可以用於製備凍存液,使細胞能夠在低溫下保存並保持其活性。
3.細胞傳代:FBS也可以用於細胞傳代過程中,幫助維持細胞的生長和穩定性。
4.細胞分離和富集:FBS還可以用於細胞分離和富集,其中,FBS的凝集作用可以促進細胞的聚集和分離。
總之,牛血清白蛋白在細胞培養中是一種重要的營養物質來源,可以為細胞提供所需的生長因子和營養物質,促進細胞的生長、增殖和分化。