Epithelix 公司 AlveolAir™模型2025版實用指南

本文為(wei) Epithelix 公司 3D 分化人源體(ti) 外肺泡上皮模型（AlveolAir™）的用戶或新用戶指南。

一、AlveolAir™技術說明

以下是 AlveolAir™模型的簡要技術說明（非詳盡版）：

Epithelix 公司生產(chan) 的 3D 體(ti) 外組織（AlveolAir™）由人源原代肺泡上皮細胞重組而成，具有以下特性：

◆由低傳(chuan) 代（P2）的人源原代細胞構成。

◆每個(ge) 組織均在標準 24 孔板的氣液界麵（ALI）中培養(yang) ，采用 Transwell 插入式培養(yang) 皿（Epithelix 公司產(chan) 品編號 EP24W，聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET）膜，孔徑 1µm），每個(ge) 插入式培養(yang) 皿置於(yu) 24 孔板的一個(ge) 孔中。

圖 1：24 孔板及配套的 24 孔規格插入式培養(yang) 皿

AlveolAir™模型為(wei) 共培養(yang) 模型：膜的頂側(ce) （暴露於(yu) 空氣）為(wei) 肺泡上皮細胞，膜的基底側(ce) （浸沒於(yu) 培養(yang) 基中）為(wei) 內(nei) 皮細胞。

圖 2：AlveolAir™模型的阿利新藍 - 蘇木精 - 伊紅（Alcian blue H/E）染色橫截麵

公司為(wei) AlveolAir™模型定製了專(zhuan) 用培養(yang) 基以維持組織培養(yang) ，訂購時請務必同時訂購培養(yang) 基！

AlveolAir™模型可模擬體(ti) 內(nei) 組織的多種特性：

◆即開即用，充分分化，功能完備，穩定期長達 2 周（“使用期"）。注：總保質期為(wei) 3 周，其中包含約 1 周的運輸時間。

◆在使用期內(nei) ，兩(liang) 種細胞類型（1 型肺泡上皮細胞（AT1）和 2 型肺泡上皮細胞（AT2））的比例保持穩定（見圖 3）。

◆可產(chan) 生表麵活性物質（SP-x 型）。

◆存在緊密連接，跨上皮細胞電阻（TEER）在使用期內(nei) 保持穩定（見圖 3）。

◆可釋放可溶性因子（細胞因子、趨化因子等）。

◆批次間重複性優(you) 異。

◆適用於(yu) 與(yu) Epithelix 公司的原代肺泡巨噬細胞共培養(yang) 。

圖 3：AlveolAir™模型的共聚焦顯微鏡圖像

二、訂購流程

本節概述組織訂購流程、常見問題及需注意的時間節點。

（一）庫存與(yu) 供貨情況

AlveolAir™僅(jin) 按需生產(chan) ，自申請周起算，發貨周期為(wei) 4-6 周。

最小訂購量為(wei) 12 個(ge) 單位（或 12 個(ge) Transwell 插入式培養(yang) 皿），無最大訂購量限製。

（二）訂購步驟

1.請先聯係上海起發說明需求、谘詢報價(jia) 或供貨情況。

2.我們(men) 將提供正式報價(jia) 並告知交貨時間表。重要提示：生產(chan) 及發貨日期一經確定，不可更改。

（三）其他信息

1.組織產(chan) 品以標準 24 孔板為(wei) 載體(ti) ，置於(yu) 營養(yang) 凝膠中，包裝在含保溫塊的恒溫箱內(nei) 發貨。

2. 強烈建議客戶在收到組織後，先培養(yang) 1/2 天再進行實驗，以便組織從(cong) 運輸過程中恢複（詳見第三節）。

三、接收與(yu) 培養(yang) 維護

收到組織後應如何操作？

（一）第 1 周 - 第 1 天

1.將組織接入培養(yang) 環境（附錄 1：AlveolAir™接入培養(yang) 步驟）。請記錄下最初寫(xie) 在培養(yang) 皿蓋子上的組織編號。

2.若部分組織的頂側(ce) 出現培養(yang) 基，可能是運輸過程導致。用連接真空泵的巴斯德吸管輕輕吸去培養(yang) 基。

3. 將組織放入培養(yang) 箱（37°C、100% 濕度、5% CO₂）。

（二）第 1 周 - 第五天

更換培養(yang) 基（附錄 2：更換培養(yang) 基步驟）

（三）第 2 周 - 第一天

1.更換培養(yang) 基（附錄 2：更換培養(yang) 基步驟）

2.可選操作：進行 TEER 測量以質控（附錄 3：Epithelix 公司 TEER 測量 protocol）

此時組織可在接下來的 2 周內(nei) （穩定期）自由用於(yu) 實驗。歡迎分享您的使用體(ti) 驗！

如需更多信息，請聯係上海起發

附錄 1：AlveolAir™接入培養(yang) 步驟

操作流程

收到產(chan) 品後，請按以下步驟操作：

1. 在超淨工作台中打開一個(ge) 新的 24 孔板，向每個(ge) 孔中加入 0.7ml 預熱至 37°C 的 AlveolAir™專(zhuan) 用培養(yang) 基。

2.取下 AlveolAir™包裝的蓋子。

3.從(cong) 包裝盒中取出培養(yang) 板。

4. 將培養(yang) 板轉移至超淨工作台內(nei) 。

5.用鑷子將插入式培養(yang) 皿從(cong) 瓊脂中取出，轉移至步驟 1 中準備好的新培養(yang) 板中。

6.將培養(yang) 板放入培養(yang) 箱進行常規培養(yang) （37°C、100% 濕度、5% CO₂）。

7. 每 2-3 天更換一次培養(yang) 基。

附錄 2：更換培養(yang) 基步驟

培養(yang) 基更換頻率：每 3 天（或更頻繁）更換一次，每次每孔加入 0.7ml 新鮮培養(yang) 基；或每 2 天更換一次，每次每孔加入 0.5ml 新鮮培養(yang) 基。

操作流程

1. 預熱足量的 AlveolAir™專(zhuan) 用培養(yang) 基至 37°C。

2.從(cong) 培養(yang) 箱中取出培養(yang) 板，在無菌超淨工作台下取下蓋子。

3.用連接真空泵的移液器或巴斯德吸管吸去所有孔中的培養(yang) 基。

4.向每個(ge) 孔中加入 0.5ml 或 0.7ml 培養(yang) 基，注意避免將培養(yang) 基灑入插入式培養(yang) 皿內(nei) 的組織上。

5.將培養(yang) 板放入培養(yang) 箱進行常規培養(yang) （37°C、100% 濕度、5% CO₂）。

附錄 3：Epithelix 公司跨上皮細胞電阻（TEER）測量 protocol

實驗材料

◆AlveolAir™專(zhuan) 用培養(yang) 基

◆EVOMX 上皮電壓電阻儀(yi) 及電極（STX2）或同等設備

◆ 0.9% 氯化鈉溶液（貨號 1000090，Bichsel 公司）

◆乙醇（貨號 02855，Fluka 公司）

操作流程

1. 向 AlveolAir™的頂側(ce) 表麵加入 200µl 預熱的專(zhuan) 用培養(yang) 基。

2.打開 EVOMX 儀(yi) 器，將電極在 70% 乙醇中清洗，儀(yi) 器屏幕應顯示：-1。

3.在生理鹽水（0.9% NaCl）中清洗電極，儀(yi) 器屏幕應顯示：0.00。

4.將電極置於(yu) AlveolAir™上，確保長電極杆穿過插入式培養(yang) 皿的間隙並靠在孔底，短電極杆位於(yu) 頂側(ce) 表麵的培養(yang) 基中。儀(yi) 器屏幕將顯示電阻值（Ω）。

5.輕輕吸去 AlveolAir™頂側(ce) 表麵的培養(yang) 基，注意不要損傷(shang) 上皮細胞。

電阻值（Ω）換算為(wei) TEER 值（Ω・cm²）的公式

TEER (Ω.cm²)=(resistance value (Ω)-100 (Ω))x0.33 (cm²)

◆100 Ω = 膜的電阻值

◆ 0.33 cm² = 上皮細胞的表麵積

注：健康的 AlveolAir™組織 TEER 值應＞100 Ω・cm²。