本文檔為(wei) Epithelix 3D 充分分化人上皮組織的現有用戶及新用戶提供指導。

1.組織的技術描述
以下是對我們(men) 組織的簡要(非詳盡)技術說明:
Epithelix 公司生產(chan) 源自人上皮上下呼吸道的 3D 體(ti) 外重組組織(MucilAir™和 SmallAir™),具有以下特性:
•由低傳(chuan) 代(P1 代)的原代人細胞構成。
•每種組織均在標準 24 孔板格式的 Transwell 插入式培養(yang) 皿中,於(yu) 氣液界麵(ALI)條件下培養(yang) 。每個(ge) 插入式培養(yang) 皿置於(yu) 24 孔板的孔中。

圖 1:24 孔板及 24 孔格式插入式培養(yang) 皿
為(wei) MucilAir™和 SmallAir™分別設計了專(zhuan) 用培養(yang) 基,以最大限度延長組織的保存期。訂購時請勿忘記同時訂購培養(yang) 基!
•MucilAir™可提供鼻、氣管或支氣管來源的版本,訂購時請注明。
•MucilAir-Pool™僅(jin) 提供鼻來源版本(由 14 位不同供體(ti) 的細胞混合而成)。
•SmallAir™由細支氣管區域的細胞重組而成。
•所有產(chan) 品均提供與(yu) 成纖維細胞共培養(yang) 的版本(HF 版本),請谘詢庫存情況。
我們(men) 的模型可模擬體(ti) 內(nei) 組織的特征:
•細胞類型完整:MucilAir™包含基底細胞、纖毛細胞和杯狀細胞;SmallAir™包含基底細胞、纖毛細胞和克拉拉細胞。
•纖毛可功能性擺動,具備黏膜纖毛清除功能。
•可產(chan) 生黏液。
•存在緊密連接。
•具備主動離子轉運功能。
•具備代謝活性 / 解毒活性(CYP450 酶係)。
•可釋放可溶性因子(細胞因子、趨化因子、金屬蛋白酶等)。
•可維持分化狀態及功能長達一年。
• 批次間重複性優(you) 異。
•即開即用。
2.訂購流程
本部分概述組織訂購流程、常見問題及需注意的時間節點。
庫存與(yu) 可獲得性
我們(men) 每周都會(hui) 重組生產(chan) 需求最高的產(chan) 品:支氣管和鼻來源的 MucilAir™,以及鼻來源的 MucilAir-Pool™。這些產(chan) 品通常可隨時供應,但無論何種情況,均請先谘詢庫存!
部分產(chan) 品需按需定製(例如:SmallAir™-CF 或 MucilAir-CF™):重組生產(chan) 過程至少需要 6 周時間,之後方可發貨。
大額訂單也需提前預訂。
訂購步驟
1.請聯係上海起發說明您的需求、谘詢報價(jia) 或庫存情況。
2.我們(men) 將向您發送正式報價(jia) 及交貨時間表。
3.請提供包含準確交貨地址和開票地址的正式采購訂單(PO),相關(guan) 信息將用於(yu) 後續流程。
運輸信息
•組織在營養(yang) 凝膠中,置於(yu) 標準 24 孔板內(nei) ,包裝在帶有加熱塊的恒溫箱中發貨。
•強烈建議客戶在收到組織後,先將其培養(yang) 2-3 天,以便組織從(cong) 運輸過程中恢複。
3.接收與(yu) 培養(yang) 維護
收到組織後應如何處理?
將組織接入培養(yang) (詳見附錄 1:MucilAir™與(yu) SmallAir™接入培養(yang) 流程)。
重要提示:收到組織後,需將其培養(yang) 2-3 天,以便組織從(cong) 運輸過程中恢複。
日常維護
•每周更換一次培養(yang) 基(詳見附錄 2:培養(yang) 基更換流程)。
•根據黏液產(chan) 生情況,每 2-4 周進行一次頂端衝(chong) 洗(詳見附錄 3:頂端衝(chong) 洗流程)。
•在任何暴露實驗前,建議提前 3 天進行頂端衝(chong) 洗,以標準化重複樣本中的黏液量。
附錄 1:MucilAir™與(yu) SmallAir™接入培養(yang) 流程

操作步驟
收到產(chan) 品後,請遵循以下步驟操作:
1.將培養(yang) 板在 37°C(濕度 99%,CO₂濃度 5%)的培養(yang) 箱中預熱 1 小時。
注:此步驟非必需,但推薦執行,以方便將培養(yang) 孔從(cong) 凝膠中取出。
2.在超淨工作台中打開一個(ge) 新的 24 孔板
3.向每個(ge) 孔中加入 0.7mL 預熱至 37°C 的 MucilAir™專(zhuan) 用培養(yang) 基。
4.打開 MucilAir™的包裝蓋。
5. 從(cong) 包裝盒中取出培養(yang) 板。
6. 將培養(yang) 板轉移至超淨工作台中。
7.用鑷子將插入式培養(yang) 皿從(cong) 凝膠中取出,轉移至步驟 2 中準備好的新培養(yang) 板中。
8.將培養(yang) 板放入培養(yang) 箱中常規培養(yang) (37°C,濕度 100%,CO₂濃度 5%)。
9. 每 2-3 天更換一次培養(yang) 基。


(步驟 2、3、4、5、6、7 配圖說明,原文略)
附錄 2:培養(yang) 基更換流程
培養(yang) 基需每 3 天更換一次,每孔加入 0.7mL 新鮮培養(yang) 基。(或每 2 天更換一次,每孔加入 0.5mL)
操作步驟
1.將足量的 MucilAir™或 SmallAir™專(zhuan) 用培養(yang) 基預熱至 37°C。
2.從(cong) 培養(yang) 箱中取出培養(yang) 板,在無菌超淨工作台中打開培養(yang) 板蓋。
3.用連接真空泵的移液管或巴斯德吸管吸出所有孔中的舊培養(yang) 基。
4.向每個(ge) 孔中加入 0.5mL 或 0.7mL 新鮮培養(yang) 基。注意不要將培養(yang) 基灑到插入式培養(yang) 皿內(nei) 的組織上。
5.將培養(yang) 板放入培養(yang) 箱中常規培養(yang) (37°C,濕度 100%,CO₂濃度 5%)。
附錄 3:頂端衝(chong) 洗流程
操作步驟
1.向組織的頂端表麵加入 200μL 預熱至 37°C 的培養(yang) 基。注意:頂端衝(chong) 洗的總時長不得超過 30 分鍾。
將培養(yang) 板放入培養(yang) 箱中常規培養(yang) (37°C,濕度 99%,CO₂濃度 5%)20 分鍾。
2.(可選步驟)若黏液不濃稠,用 P200 移液管吸取 100μL 頂端液體(ti) ,來回吹吸 3 次,以將黏液從(cong) 頂端表麵分離。
注意:切勿損傷(shang) 上皮組織。
3.小心吸出組織頂端表麵的培養(yang) 基。
注意:切勿損傷(shang) 上皮組織。

(步驟 1、2(可選)、3 配圖說明,原文略)
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