Promega●V5071●Trypsin/Lys-C Mix, Mass Spec Grade【選購指南】

🔍【產(chan) 品基礎信息】

- 貨號：V5071、V5072、V5073

- 英文名：Trypsin/Lys-C Mix, Mass Spec Grade  

- 中文名：Trypsin/賴氨酰肽鏈內(nei) 切酶混合液（質譜級）  

- 品牌：Promega

- 規格：20ug、100ug

- 應用領域：蛋白質組學研究、質譜樣品製備、翻譯後修飾分析、凝膠內(nei) 消化等  

📝【詳細介紹】  

1. 產(chan) 品組成與(yu) 技術原理  

V5071是Promega研發的Trypsin與(yu) 賴氨酰肽鏈內(nei) 切酶（Lys-C）的複合型蛋白酶混合物，專(zhuan) 為(wei) 質譜分析優(you) 化設計。  

- Trypsin：特異性切割賴氨酸（K）和Arg（R）羧基端，是蛋白組學常用的酶之一。  

- Lys-C：專(zhuan) 一性切割賴氨酸羧基端，與(yu) Trypsin互補，減少漏切位點，提升序列覆蓋率。  

兩(liang) 者協同作用，可覆蓋更廣泛的切割位點，尤其適用於(yu) 複雜蛋白質混合物的消化。  

2. 核心應用場景  

- 質譜樣品製備：用於(yu) 膠內(nei) 消化（如SDS-PAGE膠）或溶液內(nei) 消化，顯著降低漏切率。  

- 翻譯後修飾分析：精準識別磷酸化、糖基化等修飾位點，減少假陽性結果。  

- 低豐(feng) 度蛋白檢測：高酶活性設計適合微量樣本（如單細胞裂解液）的蛋白提取與(yu) 鑒定。  

3. 技術特點  

- 高純度：采用基因重組技術生產(chan) ，經HPLC純化，無動物源性汙染。  

- 低自水解活性：通過化學修飾抑製酶自身降解，確保長期穩定性（自水解率<0.1%）。  

- 廣泛兼容性：適用於(yu) 酸性（pH 2-3）至中性（pH 7-8）環境，可搭配ProteaseMAX™表麵活性劑提升膠內(nei) 消化效率。  

🎯【核心優(you) 勢詳解】  

1. 精準切割，提升數據可靠性  

- 雙酶協同：Trypsin與(yu) Lys-C的切割位點互補，減少因單一酶切割導致的序列覆蓋不全問題。例如，在膠原蛋白等富含氨酸/賴氨酸的蛋白中，Lys-C可補充Trypsin的切割盲區。  

- 低背景噪音：經嚴(yan) 格質檢，非特異性切割活性低於(yu) 0.05%，確保質譜信號清晰。  

2. 高靈敏度與(yu) 重複性  

- 低用量高效能：推薦酶:底物比為(wei) 1:50至1:100，消化時間縮短至2小時內(nei) （傳(chuan) 統酶需12小時以上）。  

- 批次一致性：每批次通過質譜驗證，確保切割模式穩定，實驗結果可重複。  

3. 靈活適應複雜樣本  

- 膠內(nei) 消化優(you) 化：與(yu) Promega ProteaseMAX™聯用，可提升膠內(nei) 蛋白回收率至90%以上。  

- 抗幹擾能力強：對SDS、尿素等去垢劑耐受性高，適用於(yu) 變性條件下的蛋白處理。  

4. 用戶友好設計  

- 即用型配方：預混酶液無需配製，直接加入樣本即可啟動反應。  

- 低溫保存穩定：-20℃短期保存（建議分裝後-80℃長期存放），避免反複凍融。  

❓【常見問題與(yu) 解答】

Q1：V5071與(yu) 普通Trypsin有何區別？  

A：V5071為(wei) Trypsin/Lys-C複合酶，切割位點更廣，漏切率更低；普通Trypsin僅(jin) 依賴單一酶切，易遺漏部分修飾位點。  

Q2：能否用於(yu) 固定化金屬親(qin) 和層析（IMAC）樣本製備？  

A：可以。V5071兼容金屬螯合樹脂，但需優(you) 化消化時間以避免金屬離子幹擾酶活性。  

Q3：消化後的肽段如何純化？  

A：推薦使用C18固相萃取柱（如Promega Sep-Pak®）或HPLC純化，去除酶及鹽分。  

Q4：是否支持自動化工作站操作？  

A：是的。V5071已通過主流液體(ti) 處理係統驗證，適用於(yu) 高通量樣本處理。  

Q5：長期保存後酶活性會(hui) 下降嗎？  

A：若按推薦條件（-20℃分裝保存）存放，活性可維持12個(ge) 月以上。建議開封後立即分裝冷凍。  

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