myPOLS Biotec正在開發新一代的聚合酶

用於(yu) 和可靠的應用，例如個(ge) 性化醫療，病原體(ti) 檢測，和RNA診斷，法醫學等等。

我們(men) 的研發活動包括：

• 改進的聚合酶用於SNP檢測和甲基化特異性PCR。
• 病原體檢測分析，例如用於流感和諾如病毒診斷。
• 具有逆轉錄酶活性的熱穩定聚合酶。
• 抑製劑抗性聚合酶，用於從樣品中直接PCR，如全血，唾液，細菌，細胞 - 顆粒，植物等。 

後但並非不重要：我們(men) 所有的酶和混合物都是在康斯坦茨內(nei) 部生產(chan) 的，並經過常規測試，符合高質量標準。

myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術公司，來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們(men) 在高通量聚合酶設計方麵的專(zhuan) 業(ye) 知識，我們(men) 為(wei) 您的應用定製酶。

RRNA / RT-PCR

Volcano2G 聚合酶

是原始Volcano 聚合酶的下一代，具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種工程化的，極其熱穩定的逆轉錄酶和組合的聚合酶，通過定向的人工進化獲得。
Volcano2G 聚合酶直接從(cong) RNA模板促進“零步驟”RT-PCR（沒有等溫逆轉錄步驟），因為(wei) 在循環PCR延伸步驟期間逆轉錄與(yu) 擴增同時發生。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應，從(cong) 而小化在高溫下熔化的RNA中的強二級結構遇到的問題。

更簡單，更快捷：0步RT-PCR協議：

跳過逆轉錄步驟。不需要等溫反轉錄步驟。 

Volcano2G是一種PCR活性逆轉錄酶，具有*的熱穩定性，在95°C的半衰期> 40 min。

當添加實時PCR染料時，Volcano2G 聚合酶也可用於(yu) 實時PCR。Volcano2G具有韦德唯一官方 聚合酶樣核酸酶結構域，因此也適用於(yu) 基於(yu) 水解探針的分析。如此處所示，通過使用基於(yu) 探針的qPCR測定和零步驟RT-PCR方案，使用10倍稀釋係列的總RNA檢測NONO mRNA：

詳細的產品說明

Volcano2G 5x反應緩衝(chong) 液針對擴增子大小在60-300bp之間進行了優(you) 化。

當添加合適的實時PCR染料或熒光探針時，Volcano2G逆轉錄酶也可用於(yu) 實時PCR。
這種*的酶能夠進行基於(yu) PCR的RNA檢測，無需單獨的逆轉錄步驟。
Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地檢測≥1ng總RNA輸入的RNA靶標。

Volcano2G 聚合酶不需要Mn 2+  以獲得宜活性。然而，通過向反應中添加Mn 2+可以進一步優(you) 化一些測定（建議的範圍是0.5-1mM，未提供Mn 2+）。

質量控製

RT-PCR活性：測試Volcano2G 聚合酶活性的成功RT-PCR性能。在PCR循環儀(yi) 中從(cong) 人總RNA提取物擴增151bp片段（HPRT1 mRNA），並將其顯示為(wei) 單一擴增產(chan) 物。
聚合酶活性：已經使用人工模板和引物監測Volcano2G聚合酶活性並將其調整為(wei) 特定的聚合酶活性。
通過蛋白質特異性染色確定酶濃度。有關(guan) 批次特定濃度，請通過info@mypols.de查詢更多信息。

存儲

本產(chan) 品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時存放產(chan) 品。

應用

• 快速檢測和鑒定RNA靶標
• 逆轉錄PCR（RT-PCR）
• 實時RT-PCR
• SELEX
• 入門擴展

反應設置

將所有組件保存在冰上。
在使用前仔細旋轉並混合所有溶液。

*推薦的終模板濃度在5-50 ng /μl之間。 

典型的0步RT-PCR方案（不需要等溫逆轉錄步驟）

可以使用兩(liang) 步法和三步法PCR方案。
*通過運行溫度梯度來理想地建立新的PCR，以便找到每個(ge) 引物對的宜退火/延伸溫度。引物的退火溫度受其核酸序列和反應緩衝(chong) 液組成（鹽和pH）的強烈影響。Volcano2G 聚合酶在50-95°C之間活躍。

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