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Haematologic HCIX-0040說明書

發布時間：2018/10/15點擊次數：484

Haematologic HCIX-0040說明書(shu)

HTI HCIX-0040

 

Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注冊(ce) 公司，是一家專(zhuan) 業(ye) 從(cong) 事體(ti) 外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要製造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產(chan) 品係列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑製劑，以及單克隆和多克隆抗體(ti) 的互補係列。還可提供因子缺乏的等離子體(ti) 和定製的血液采集管，用於(yu) 臨(lin) 床研究。提供的服務包括定製蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同製造和合同研究。

 

Haematologic HCIX-0040說明書(shu)

 

Coagulation Factor IX

凝血因子IX

 

 

  •  

HCIX-0040 人因IX

 

  •  

尺寸

100微克

公式

50％甘油/水（v / v）

  •  

存儲(chu)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95％

  •  

活動決(jue) 定

凝血試驗

保質期（妥善保存）

12個(ge) 月

  •  
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 BCIX-1040 牛因子IX 

  •  

尺寸

100微克

公式

50％甘油/水（v / v）

  •  

存儲(chu)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95％

  •  

活動決(jue) 定

凝血試驗

保質期（妥善保存）

12個(ge) 月

  •  

 

酶原因子IX是單鏈維生素K依賴性糖蛋白，其在肝髒中合成（1-3）。因子IX的結構域結構類似於(yu) 其他維生素K依賴性凝血因子的結構域結構。NH 2 - 末端區域含有12個(ge) γ-羧基穀氨酸（gla）殘基，其促進因子IX與(yu) 帶負電荷的磷脂表麵的鈣依賴性結合。與(yu) 表皮生長因子（EGF）同源的兩(liang) 個(ge) 結構域跨越NH2-末端gla結構域和活化肽（Ala-146至Arg-180）之間的區域。

因子IX由因子XIa或因子VIIa /組織因子/磷脂複合物激活。位點A處的切割（參見圖）產(chan) 生中間體(ti) IXa，其隨後通過在位點B處的切割而轉化為(wei) *活性形式IXaβ.NH2-末端輕鏈（GLA和EGF結構域）保持共價(jia) 連接至COOH-末端重鏈。通過二硫鍵。絲(si) 氨酸蛋白酶催化三聯體(ti) （Ser-365，His 221，Asp-269）位於(yu) 重鏈中。因子IXaβ是“內(nei) 因子Xase複合物”（因子VIIIa / IXa / Ca2 + /磷脂）的催化組分，其將因子X蛋白水解活化為(wei) 因子Xa。

通過常規方法（4）和免疫親(qin) 和層析（5）的組合從(cong) 新鮮冷凍血漿製備人因子IX。通過Fujikawa等人描述的方法的改進，從(cong) 新鮮的檸檬酸化牛血漿製備牛因子IX。（6）。純化的蛋白質以50％（vol / vol）甘油/ H2O提供，應儲(chu) 存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度，並使用因子IX凝固測定法測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12％Bis-Tris

加載

人因子IX，每泳道1μg

緩衝(chong)

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），穀氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的）

 

本土化

等離子體(ti)

血漿濃度

4-5ug / ml（人）（1）

行動方式

酶原; 絲(si) 氨酸蛋白酶因子IXa的前體(ti)

分子量

55,000（人類）（8）
55,400（牛）（6）

消光係數

Ë

1％

1厘米，280納米

 

= 13.2（人類）（7）

 

 

= 12.0（牛）（6）

 

等電點

4.2-4.5（人類）（7）
3.7（牛）（6）

結構體(ti)

單鏈，NH2-末端gla-結構域，兩(liang) 個(ge) EGF結構域

碳水化合物百分比

17％（人類）（7）
26％（牛）（6）

翻譯後修改

一個(ge) β-羥基天冬氨酸（9），十二個(ge) 玻璃殘留物（7）

 

 

  1. Thompson，AR，Blood，67,565（1986）。
  2. Hedner，U。，et al。，In Hemostasis and Thrombosis，2nd edition，ed。RW Colman，J。Hirsh，VJ Marder，EW
  3. 薩爾茲曼，第39-47頁。JP Lippincott Co，費城，1987年。
  4. Fujikawa，K.，Davie，EW。，Methods in Enzymology，45,74（1976）。
  5. Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
  6. Jenny，RJ，et al。，Prep。Biochem。，16,227（1986）。
  7. Fujikawa，K。等，Biochemistry，12,4938（1973）。
  8. Discipio，RG等，Biochemistry，16,698（1977）。
  9. Osterud，B.，et al。，J.Biol。Chem。，253,5946（1978）。
  10. McMullen，BA，et al。，BBRC，115,8（1983）。

 

 

 

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