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Haematologic HCXI-0150說明書

發布時間：2018/10/15點擊次數：578

Haematologic HCXI-0150說明書(shu)

HTI HCXI-0150

 

Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注冊(ce) 公司，是一家專(zhuan) 業(ye) 從(cong) 事體(ti) 外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要製造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產(chan) 品係列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑製劑，以及單克隆和多克隆抗體(ti) 的互補係列。還可提供因子缺乏的等離子體(ti) 和定製的血液采集管，用於(yu) 臨(lin) 床研究。提供的服務包括定製蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同製造和合同研究。

 

Haematologic HCXI-0150說明書(shu)

Human Coagulation Factor XI

人凝血因子XI

HCXI-0150 Human Factor XI

 

 

因子XI
的結構域結構表示因子XI單體(ti) 的結構域結構。鑒定為(wei) R1至R4的區域對應於(yu) 四個(ge) 串聯氨基酸序列重複，其終包含因子XIa的重鏈。在因子XIIa的蛋白水解活化期間，包含因子XIa的輕鏈的“催化結構域”從(cong) 重鏈區域切割下來。因子XIa的重鏈和輕鏈通過二硫鍵保持相關(guan) 。成熟因子XI分子是由兩(liang) 個(ge) 明顯相同的單體(ti) 組成的同型二聚體(ti) ，其通過二硫鍵保持締合。

 

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HCXI-0150 人因XI 

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尺寸

50微克

公式

50％甘油/水（v / v）

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存儲(chu)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95％

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活動決(jue) 定

凝血試驗

保質期（妥善保存）

12個(ge) 月

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因子XI是血漿糖蛋白，其在與(yu) 高分子量激肽原的非共價(jia) 複合物中循環（1）。成熟分子在肝髒中合成，是雙鏈同源二聚體(ti) ，分子量約為(wei) 160,000（2,3）。據估計，總質量的5％可歸因於(yu) 碳水化合物（2）。兩(liang) 種相同的單體(ti) 具有80,000的分子量，並通過二硫鍵連接在一起。因此，通過SDS-PAGE分析，因子XI表現為(wei) 單一條帶，非還原（Mr = 160,000）和還原（Mr = 80,000）。

因子XI作為(wei) 酶原循環並且需要蛋白水解活化以獲得絲(si) 氨酸蛋白酶活性。因子XI向因子XIa的轉化由因子XIIa催化，並導致每個(ge) 單體(ti) （3）中Arg369-Ile370鍵的裂解。因子XIa由兩(liang) 個(ge) NH2-末端衍生的重鏈和兩(liang) 個(ge) COOH-末端衍生的輕鏈組成，所有這些輕鏈通過二硫鍵保持在一起。因子XIa通過催化因子IX向因子IXa的轉化而參與(yu) 凝血的內(nei) 在途徑。一種稱為(wei) 血漿促凝血酶原激酶前因缺陷的出血性疾病是由缺乏因子XI促凝血活性引起的（4,5）。在因子XI缺陷患者中觀察到的可變的出血傾(qing) 向與(yu) 因子XI活性或抗原水平無關(guan) 。

從(cong) 曆*看，因子XI由於(yu) 其相對較低的血漿濃度及其對蛋白水解的敏感性而難以純化（6）。因子XI從(cong) 新鮮冷凍血漿中純化，其通過添加的抑製劑穩定。首先用BaCl 2處理血漿以除去維生素K依賴性蛋白質，然後通過親(qin) 和層析分離因子XI。在肝素瓊脂糖凝膠上的終色譜步驟產(chan) 生完整因子XI的均勻製備。成品以50％（vol / vol）甘油/ H2O供應，應儲(chu) 存在-20oC。

凝膠

Novex 4-12％Bis-Tris

加載

人因子XI，每泳道1μg

緩衝(chong)

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），穀氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的）

特別說明

由於(yu) 存在高達50％的β形式，重鏈是雙重鏈。α-Xa向β-Xa的轉化通過α-Xa對α-Xa的自動切割發生，導致COOH末端肽的喪(sang) 失。

 

 

本土化

等離子體(ti) ; 與(yu) 高分子量激肽原相關(guan)

血漿濃度

2-7μg/ ml（2,3,7,8）

行動方式

酶原; 絲(si) 氨酸蛋白酶因子XIa的前體(ti)

分子量

160,000（人類）（2,3）

消光係數

Ë

1％

1厘米，280納米

 

= 13.4（人類）（2）

 

等電點

8.9-9.1

結構體(ti)

同二聚體(ti) 由兩(liang) 個(ge) 明顯相同的亞(ya) 基（Mr~80,000）組成，由二硫鍵連接在一起。單體(ti) 含有四個(ge) 串聯氨基酸重複序列，與(yu) 血漿前激肽釋放酶具有同源性（9）。

碳水化合物百分比

5％（人）（2）

  1. Thompson，RE，et al。，J.Clin。Invest。，60,1376（1977）。
  2. Kurachi，K。和Davie，EW，Biochemistry，16,5831（1977）。
  3. Bouma，BN和Griffen，JH，J.Biol。Chem。，252,6432（1977）。
  4. Rosenthal，RL，et al。，Proc。SOC。進出口。生物學。Med。，82,171（1953）。
  5. Forbes，CD和Ratnoff，J.，J。Lab。臨床。Med。，79,113（1972）。
  6. Kurachi，K。和Davie，EV，Methods Enzymol。，80,211（1981）。
  7. Wuepper，KD，美聯儲。Proc。，31,624（1972）。
  8. Saito，H。和Goldsmith，G.，Blood，50,377（1977）。
  9. Fujikawa，K。等，Biochemistry，25,2417（1986）。

 

 

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