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Abraxis 544103使用方法

發布時間:2018/12/4點擊次數:617

Abraxis 544103使用方法

Product No. 544100 (5 mL), 544103 (60 mL), 544106 (450 mL)

AbraMag® Size Selection Magnetic Beads

AbraMag 大小選擇磁珠

  • 通用描述AbraMag 大小選擇磁珠設計用於從剪切的或類似樣本中純化出所需大小的片段,用於下遊應用,如 作為排序。碎片被可逆地結合在順磁性粒子上,而剩餘的引物、鹽、酶和在反應中留下的遊離核苷酸被衝走。這些珠子是為使用而設計的。 有磁選機架。
  • 當使用核酸時,安全指南總是使用適當的防護設備(包括但不限於手套、實驗室外套和安全玻璃)。 。有關進一步信息,請參閱安全數據表。
  • 儲存和穩定在交貨時,存放在4°C,不要凍結磁珠溶液。不要在打印的過期日期後使用。
  • Abramag 大小選擇磁珠法使用一種簡單、、基於磁性珠的方法從混合反應中純化片段,如下所示 gure

 

 

Figure 1. Schematic of the AbraMag® Size Selection Magnetic Beads process.

 

  • a.混合:將混合樣品添加到已清洗的AbraMag磁珠中。

b.結合:在經過優(you) 化的緩衝(chong) 器存在的情況下,具有理想大小的片段與(yu) 珠子結合。磁鐵是用來 守住珠子。

.c.洗滌:底漆和/或其他不想要的試劑分兩(liang) 步洗掉

  • 洗脫:然後將碎片洗脫並轉移到一個新的管中。

.E.Downstr EAM應用:純的,高質量的分離片段可用於(yu) 下遊程序,如克隆和測序。

 

 

 

限製和預防措施樣品表現的時候,在分子生物學級水或Tris/TE溶液之前,尺寸選擇。如果需要一個(ge) 簡單的pcr清理(>100 bp),而不是大小se(>100 bp)。 使用Abramag聚合酶鏈反應清潔磁珠(PN 555030(5 ML),555035(60 ML),555040(450 ML)。

 

工作指令

 

A.提供的材料AbraMag 大小選擇磁珠溶液

 

B.所需的額外材料和設備(不包括在產(chan) 品中)

 

1.剪切或其他樣本

 

2.實驗室級水

 

3.新製備的70%乙醇

 

4.分子級TE緩衝(chong) 液pH 8.0(10 mm Tris,1mm EDTA pH 8.0)

 

5.一次性手套和其他防護設備

 

6.帶一次性塑料過濾屏障的微型吸管

 

7.1.5mL無菌無核酸微離心管

 

8.4°C製冷機

 

9.磁性微離心管分離器,Solo(PN 472270),Multi-6(Pn 472260),微滴板側(ce) 拉(Pn 472235)或底拉(Pn 472236)或類似設備

 

10. Vortexer

 

C.為(wei) 所需尺寸選擇珠比

 

通過改變Abramag 大小選擇磁珠與(yu) 起始樣品體(ti) 積的比值,可以控製有利於(yu) 50~400 bp的片段的截留。圖2 下麵是凝膠電泳分析的大小選擇根據增加的比率。例如,檢查表1的比率。

 

 

圖2.梯狀電泳的2%瓊脂糖凝膠電泳顯示珠液與(yu) 樣品比對片段大小排除的影響。100伏25分鍾。

 

表1.示例珠比和由此產(chan) 生的大小選擇使用50公分的起始樣本。

 

D.程序

 

將樣品轉移到1.5mL微離心管中進行純化。用實驗室級水將樣品稀釋至少50升.注意:要使用更大容量的開始樣本,隻需乘以 按預期比率計算(第6.C節)。例:100升樣品x1.5=使用第6.D.2節中150升的珠子溶液。注:可以節省少量的起始產(chan) 品用於(yu) 凝膠分析。見第7.B節。

 

用~1秒脈衝(chong) 旋轉AbraMag 大小選擇磁珠。確保解決(jue) 方案*重新暫停。檢查第6.C節以確定使用煙草的珠子溶液的數量 將珠子添加到所需的比例並添加到樣品中。吸管上下混合。建議嚐試與(yu) 所需大小選擇接近的比率範圍,以便選擇 模仿片段大小選擇。

 

將樣品/珠子混合物在室溫下孵育5分鍾。

 

將樣品放在磁選機上,直到溶液清澈(~1分鍾)。將管子留在分離器上,吸走並丟(diu) 棄上清液,而不幹擾有蓋特的珠子。 對著磁鐵。5.將管子放在分離器上,輕輕地加入200升新鮮配製的70%乙醇,而不將珠子從(cong) 管子的側(ce) 麵移開。坐30秒。吸出 把上清液扔掉。

 

6.重複步驟5進行第二次清洗。小心去除所有可吸入乙醇。

 

7.將管子從(cong) 磁選機上取出,在室溫下離開約3分鍾,打開蓋子,*蒸發任何殘留的乙醇。

 

8.在樣品中加入40升TE緩衝(chong) 液、pH8.0或實驗室級水。吸管上下混合。室溫下孵育2-3分鍾。將管子送回磁選機1米 降落傘(san) 。將試管留在分離器上,用吸管將洗脫液轉移到新的微離心管中。洗脫液中含有大小選定的片段。

 

7分析結果

 

A.產(chan) 品回收可以使用帶插層染料的熒光計、凝膠電泳分析和/或分光度計來確定。

 

確定凝膠電泳法可用於(yu) 評價(jia) 大小選擇的效果,並可用於(yu) 檢查比例的優(you) 化。使用瓊脂糖或凝膠,運行洗脫樣本。 在科收回

 

D.8與(yu) 分子量階梯相比較,確保選擇了所需的片段大小。

AbraMag ®磁珠超順磁性,非聚集的鐵氧化物顆粒(或“微球”),用於(yu) 樣品製備,或用於(yu) 捕獲/純化(SPRI ™:固相可逆固定)靶例如蛋白質,抗體(ti) , / RNA(直接,或通過ChIP,RIP或CLIP),外泌體(ti) 和大腸杆菌。AbraMag的設計可在手動和自動生物醫學和研究應用中實現更快的結合動力學,高靈敏度和選擇性。

 

比主要競爭(zheng) 對手更高的產(chan) 量,純度,質量和價(jia) 值。

 

● 多重優(you) 勢 - 超過傳(chuan) 統方法(色譜柱,離心)。

● 的性能 - 我們(men) 設計它們(men) 以匹配或超越競爭(zheng) 對手。

● 的容量和產(chan) 量 - 高結合能力,可快速有效地進行目標純化。

● 的純度 - 穩定的預先封閉的顆粒即使是複雜的樣品也能提供清潔的淨化。

● 可定製 - 提供定製珠子和連接服務。

 

磁選機

反-E。大腸杆菌磁珠(IMS)

即用型磁珠,25 mg / ml(2.5%)

具有遊離胺或羧基的磁性顆粒,可使用簡單的步驟(提供)與(yu) 您的抗體(ti) 或其他配體(ti) 偶聯。

胺 - PN 544080(2 ml),PN 544081(5 ml)

羧基 - PN 544085(2 ml),PN 544086(5 ml)。

Protein A / Protein G Magnetic Beads,5 mg / ml

Protein A Magnetic Beads - PN 544030(2 ml),PN 544031(5 ml)

蛋白A磁珠純化試劑盒 - PN 555000(20個(ge) 樣品)

蛋白G磁珠 - PN 544040(2 ml),PN 544041(5 ml)

蛋白G磁珠純化試劑盒 - PN 555010(20個(ge) 樣品)

抗IgG磁珠,5 mg / ml

抗小鼠IgG磁珠 - PN 544020(4 ml),PN 544021(20 ml)

抗兔IgG磁珠 - PN 544010(4 ml), PN 544011(20 ml)

抗人IgG磁珠 - PN 544060(4 ml),PN 544061(20 ml)

Streptavidin / Biotin Magnetic Beads,5 mg / ml

Streptavidin Magnetic Beads - PN 544050(2 ml),PN 544051(5 ml)

生物素磁珠 - PN 544000(2 ml),PN 544001(5 ml)

 

/ RNA純化磁珠

新 尺寸選擇/ PCR純化磁珠

AbraMag ® 尺寸選擇和PCR純化磁珠被設計成淨化所需大小的片段。

●為(wei) 了替代AMPure ® XP / SPRIselect ®和血清彈匣 ™ Speedbeads ™的性能相當,但更好的價(jia) 值(參見比較數據)。

●去除汙染物:引物,引物二聚體(ti) ,dNTP,鹽等。

●尺寸截止範圍> 50至> 800 bp(尺寸選擇)或> 100bp(PCR純化)

●處理時間短:無離心或過濾

●管或微孔板格式

●適合手動或自動過程

大小選擇Magnetic Beads PN 544100(5 ml),544103(60 ml),544106(450 ml)

PCR Clean-Up Magnetic Beads PN 555030(5 ml),555035( 60 ml),555040(450 ml)

純化磁珠,12毫克/毫升

AbraMag ® 純化磁珠結合在高容量(基因組,質粒等)。將它們(men) 插入您當前的磁珠純化方案中,以獲得更高的產(chan) 量,純度和價(jia) 值。珠子的表現始終優(you) 於(yu) 競爭(zheng) 對手的珠子(參見比較數據)。

PN 544090(1ml)

基因組純化試劑盒,磁珠

的AbraMag ®基因組磁性純化試劑盒被設計為(wei) 從(cong) 不同的生物樣品純化的基因組,得到的高收率和低RNA,蛋白質,核酸酶,和其它細胞汙染物。

PN 555020(100個(ge) 樣本)

mRNA純化磁珠,為(wei) 5mg / ml的

AbraMag ® mRNA純化磁珠加上寡(dT)25,在高容量結合多聚腺苷酸化的mRNA和mRNA的洗脫基本上不含核糖體(ti) RNA。將珠子插入您當前的磁珠mRNA純化方案中,以獲得更高的產(chan) 量,純度和價(jia) 值。

PN 544075(2ml)

mRNA純化試劑盒,磁珠

的AbraMag ® mRNA的磁性純化試劑盒被設計為(wei) 從(cong) 總RNA純化的mRNA,使多聚腺苷酸化的信使RNA的高產(chan) 量,同時留下核糖體(ti) RNA(rRNA基因)和其他RNA後麵。

PN 555025(10個(ge) 樣本)

 

 

 

 

 

 

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7:我們(men) 還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發,歡迎合作。

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