sanquin M1551現貨

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sanquin M1551說明書

Peliclass ELISA combikit IgG1 + 2 + 3 + 4

產品規格

文章編號

M1551

產(chan) 品組

IgG亞(ya) 類，Elisa

尺寸

4 x 48孔

技術

ELISA

血清中人IgG亞類的ELISA檢測試劑盒（EN）

ELISA kit for quantitative determination of human IgG subclasses in serum (en)

一、導言
人胰島素樣生長因子包括四個(ge) 亞(ya) 類：胰島素樣生長因子1、胰島素樣生長因子2、胰島素樣生長因子3和胰島素樣生長因子4。Igg亞(ya) 類的生物化學特性
Described Extensively（1-5）.在幾種生物重要功能中，如
抗原識別、補體(ti) 活化和結合到細胞表麵受體(ti) 很多研究都揭示了血清中的異常
IGG亞(ya) 類水平可能與(yu) 各種疾病狀態有關(guan) 。特別是選擇性IGG2亞(ya) 類缺陷的組合
隨著病毒或細菌感染的易受感染性的增加，已大量記錄在案（4、5）。人胰島素樣生長因子2或胰島素樣生長因子3的低血清水平
報告的患者中有複發性上皮和低呼吸道感染。其他人建立了一個(ge) 非常低的協會(hui)
血清濃度與(yu) 中肺再生感染（6）子群血清中的異常也有
在自身免疫疾病、神經疾病和艾滋病毒感染中觀察到（4）。
二技術原則
試劑盒英文名稱含有高塗層微粒條紋的試劑盒
禽單克隆抗體(ti) ，每種抗體(ti) 的一個(ge) 亞(ya) 類人的特異性。測試樣品，校準和控製將被孵化
在各自的井裏。被確定的Igg亞(ya) 類將被固相結合，而非邊界Igg被清洗。Next，
過氧化物酶共軛抗人免疫血清添加到每個(ge) 井中，洗滌後清除了非邊界共軛物。之後
用堿性溶液（ABTS）和H2O2進行孵化，用酸性緩衝(chong) 阻止反應。綠色反應產(chan) 品是
在測試樣品中通過吸收和亞(ya) 類Igg濃度的測定，與(yu) 參考曲線的價(jia) 值相對應。
測定了IGG亞(ya) 類控製血清的校準曲線的有效性和IGG亞(ya) 類的精度。
決(jue) 定
根據WHO 67/97參考材料製備的校準器確定了校準器中的IGG亞(ya) 類水平。茶
Recommended target values of 5.0 g/l for IGG1，2.6 g/l for IGG2，0.4 g/l for IGG3 and 0.5 g/l for IGG4 were used（7）.
三、儲(chu) 存和穩定性
人骨髓細胞亞(ya) 綱應在2-8°C保持新版本，並可在標簽上使用，直至期滿之日為(wei) 止。
開放後所有部件的穩定度為(wei) 1周，在2-8°C時保存。
運輸條件可能不同於(yu) 儲(chu) 存條件。
IV.Contents of the KIT
See the table at the beginning of this package insert.
人亞(ya) 組蛋白含有足夠的反應物，用於(yu) 每個(ge) 亞(ya) 組的48個(ge) 測試，包括校準器、控製器和布蘭(lan) 克。
用柱色譜法純化組織培養(yang) 基中的單克隆抗體(ti) （離子交換與(yu) 親(qin) 和性）
色譜法校準與(yu) 控製是液體(ti) 的人。
五.安全
本發明涉及一種含有危險貨物的骨細胞抑製劑（HOLDS）酶聯免疫（ELISA）試劑盒（酶聯免疫吸附試驗法）。

危險象形圖：GHS07
信號詞：警告
危險說明：
H319引起嚴(yan) 重的眼睛刺激
預防說明：
P280佩戴護目/麵部防護
P264處理後*洗手
P305+P351+P338如果進入眼睛：用水小心衝(chong) 洗幾分鍾。取下隱形眼鏡（如果有且容易取下）
做。繼續衝(chong) 洗
p337+p313如果眼睛刺激持續：請就醫
六、所需附加材料
稀釋洗滌-稀釋-和基質緩衝(chong) 液的蒸餾水。
-準確輸送體(ti) 積的移液裝置。
-培養(yang) 箱（37±2°C）。
-一個(ge) 標準的酶聯免疫吸附洗滌器或一個(ge) 500毫升的塑料噴水瓶，用於(yu) 自動或手動清洗條帶。
-用於(yu) 測量414 nm或405 nm吸光度的標準酶聯免疫吸附測定儀(yi) 。
日誌線性紙。
七。試樣處理
隻有血清樣本應該被測試。樣品應盡可能新鮮或冷凍保存。
使用前應手動稀釋樣品（見VLL分析方案）。
八。分析協議
-將所有試劑置於(yu) 室溫（18-25°C）並充分混合。避免氣泡或泡沫。
建議對所有樣品、對照品和校準品稀釋液進行一式兩(liang) 份的測試。
1。微量滴定板
Peliclass人IgG亞(ya) 類酶聯免疫吸附測定試劑盒提供了在不同場合使用部分平板的靈活性。
打開塑料袋之前，確定測試所需樣品數量所需的條帶數量加上所需的14口井。
用於(yu) 運行校準器、控件和空白兩(liang) 份。從(cong) 板架上拆下不使用的板條，然後重新包裝
含有幹燥劑的塑料袋，存放溫度為(wei) 2-8°C。

2。緩衝(chong) 液配製
洗滌緩衝(chong) 液：在950ml蒸餾水中加入洗滌緩衝(chong) 液濃縮液瓶的總含量，製備洗滌緩衝(chong) 液。
稀釋的洗滌緩衝(chong) 液必須在2-8°C下儲(chu) 存，並保持穩定1周。
注：濃縮緩衝(chong) 液可能含有鹽晶體(ti) 。在製備工作強度緩衝(chong) 液之前，將濃縮緩衝(chong) 液加熱
短暫至37°C以溶解晶體(ti) 。
稀釋緩衝(chong) 液：計算所需稀釋緩衝(chong) 液的數量（每個(ge) 微孔條約2毫升未稀釋緩衝(chong) 液），並製備
工作強度溶液，將緩衝(chong) 液在蒸餾水中稀釋10倍。
三。校準品和對照血清的製備
濃度見所附信息傳(chuan) 單的表2和表3。
校準器：（見隨附信息傳(chuan) 單的表1）用“1:500”標記一根10毫升試管，用“1:8”標記八根3毫升試管。
分別。
將4.99毫升稀釋緩衝(chong) 液移到10毫升的試管中，加入10μl的校準血清（初始稀釋液1:500）。移液管1.9毫升
將標有“cal1”和1.0 ml的試管中的稀釋緩衝(chong) 液倒入標有“cal2-cal8”的試管中。
將100μl 1:500稀釋校準器移液管1，從(cong) 該管中加入1.0 ml
上一次稀釋到下一個(ge) “校準”管。為(wei) 每個(ge) igg子類選擇校準器稀釋係列：igg1 1:80000-1:1280000
igg2、igg3和igg4 1:10000-1:160000。
對照組：在一根試管上貼上“1:500”標簽，兩(liang) 根3毫升試管上貼上“1:30000”（用於(yu) IGG2、3、4）和“1:240000”（用於(yu) IGG1）標簽。
管內(nei) 移液管用1:500毫升稀釋緩衝(chong) 液和10升對照血清標記。
移液管內(nei) 貼有1:30000 885μl稀釋緩衝(chong) 液和15μl 1:500稀釋液的標簽。
試管中的移液管標記有1:240000 875μl稀釋緩衝(chong) 液和125μl 1:30000稀釋液。
準備一管3毫升的稀釋緩衝(chong) 液作為(wei) 空白。
4。樣品的製備
稀釋液與(yu) 對照血清相同的稀釋液稀釋試驗樣品。對於(yu) 超出給定範圍的結果
範圍（見隨附信息傳(chuan) 單的表1），應使用不同的樣品稀釋液重複試驗。
5。次洗滌步驟
用洗滌緩衝(chong) 液洗滌板架上所需的微孔四次。手動清洗時，*注入井內(nei) （>300
使用洗滌緩衝(chong) 液並丟(diu) 棄，重複此步驟三次。後，井應該是*空的。隨後的
應立即加入試劑，不要讓井長時間幹燥。
6。步孵化
將100微升稀釋的校準器、對照品、樣品和空白物添加到適當的孔中。
用粘合密封件蓋住板，輕敲微量滴定板邊緣幾秒鍾，輕輕攪拌，以混合每口井的內(nei) 容物。
在37°C下培養(yang) 1小時。
清洗前，按照第8點所述準備下一種培養(yang) 試劑。

7。第二步，洗
吸入supernatant from the the井洗板5在AS點描述的程序辦理。
8。incubation共軛抗體(ti) 與(yu) 人IgG HRP—to
dilute by the共軛1∶500µL移液30毫升稀釋14.97 of the共軛到緩衝(chong) 區。dilute共軛：繼續to the
1：3000×1.2毫升移液稀釋1：of the 500毫升稀釋到緩衝(chong) 區6。
1：2000×2.0毫升移液稀釋1：of the 500毫升稀釋到緩衝(chong) 區6。
1：1000×3.5毫升移液稀釋至1∶500 of the 3.5毫升稀釋緩衝(chong) 。
of the 100µL：add to the 1:500稀釋抗IgG1的微孔條；
100µL of the 1:3000稀釋to the反IgG2的微孔條；
100µL of the 1:2000稀釋to the IgG3抗微孔條；
100µL of the 1:1000稀釋抗人IgG4 to the微孔條。
覆蓋板與(yu) 粘接密封茶葉，攻絲(si) 模式邊緣輕輕（for a幾秒到the contents of each混合好。
在37°C孵育1小時）。
隻是之前洗下incubation試劑準備在10點和描述的程序辦理。
9。三步洗
吸入supernatant from the the井洗板5在AS點描述的程序辦理。
10。incubation與(yu) ABTS底物
底物溶液（calculate the amount of相角近似為(wei) 0.9毫升的微孔條will be needed）。
equivalents add the solution of 200µL氫過氧化物的股票和股票400µL溶液20 mL of  ABTS的工作強度
底物緩衝(chong) 液（18底物溶液2毫升+股票distilled毫升水）。
add to 100µL的底物溶液的井。
攻絲(si) 模式的邊緣輕輕地大一些microtitreplate for the seconds to the contents of each混合好。
在室溫孵育30分鍾換（18 - 25°C）。
11。停止酶反應
50µL add to solution of停在井。
12。板讀取超時
在1小時內(nei) （閱讀414 preferably）或安在405 nm）的閱讀器。
結果和解釋（九日。
absorbance at the -記錄（414 preferably for each 405 nm）或平均值和複製的好茶。
- duplicates should not for each樣品有什麽(me) 區別，超過平均值15% from the。如果卵巢duplicates黑莓，should be the法
重複灌水。
圖- absorbances校準器（the average of the Y軸）與(yu) 茶相關(guan) 的subclass毫微克/毫升的濃度（X軸）的在線日誌線性
適合的擬合曲線和紙畫。
- the levels of the調控血清IgG subclass should FIPS在範圍（S）表3 of the given在封閉的信息傳(chuan) 單。
the average value for - each absorbances插值曲線上的參考樣品。
測試顯示均值- samples which the range of the“absorbance dilutions參考曲線，appropriately should be稀疏。
- subclass for an評價(jia) IgG濃度在測試樣品中出現found the levels，with the values for  normal IgG
subclasses（EEA X參考靶道）。

X.測定範圍
關(guan) 於(yu) 試劑盒特定的分析範圍，請參閱隨附信息傳(chuan) 單的表1。
四
十一。參考範圍
健康高加索個(ge) 體(ti) 血清樣品中IgG亞(ya) 類的參考範圍（G/L）（8）。其他人群分開
應獲得參考範圍。

注：
試驗的具體(ti) 性能特性所引用的值代表典型結果，不應視為(wei) 規範。
這個(ge) 工具包。
十三。限製
1。用戶應接受培訓，熟悉酶聯免疫吸附試驗和檢測程序。
2。不應使用大量溶血或含脂樣品。對於(yu) 含有
類風濕因子，高膽紅素水平，或其他循環免疫複合物。這些樣品應采用其他方法進行分析。
三。超出範圍的樣品，如副蛋白，應使用不同的稀釋液重複。
4。發現其中一個(ge) IgG亞(ya) 類的水平降低永遠不能提供明確的診斷，但應該考慮。
作為(wei) 免疫係統紊亂(luan) 的跡象，需要進一步的診斷調查。
5。控製血清應始終用於(yu) 檢查校準曲線的有效性。當控件超出範圍時，
試驗樣品不可靠。應重複試驗。
6。不同批次的試劑不能互換。
7。剩餘(yu) 的試劑（如靜容量）不應與(yu) 新開小瓶的內(nei) 容物混合。
8。瓶蓋和小瓶不能互換。應更換相應小瓶上的瓶蓋。
9。盡管人類校準品和對照血清已經被檢測出特定疾病傳(chuan) 播因子的標記物。
根據歐盟現行的藥品生產(chan) 質量管理規範指南，所有來源於(yu) 人類的成分應被視為(wei)
可能具有傳(chuan) 染性。
10。防腐劑：硫柳汞®0001%。
11。在酶聯免疫吸附試驗的每個(ge) 培養(yang) /固定步驟中使用新的平板封條，以避免交叉汙染。不要使用鋁
箔。
12。每次轉移時使用一次性移液管頭，以避免交叉汙染。
13。每次使用該試劑盒時，應進行校準器、共軛物和緩衝(chong) 器的新稀釋。
14。不要使用與(yu) 試劑盒一起提供的試劑和微量滴定條。
15。疊氮化納滅活HRP，不使用含疊氮化納的溶液，也不向提供的緩衝(chong) 液中添加疊氮化納。
16。應根據實驗室規定進行廢物處理。

XIV. 參考

1. Shakib, F. (Editor), Monograph in Allergy, Karger A.G., 19 (1986). 2. Shakib, F. (Editor), The human IgG subclass, Pergamon Press (1990). 3. Vlug, A. et al., Eur. Clin. lab., 8:26 (1989). 4. Jefferis, R. et al Clin.Exp.Immunol. 81:357 (1990). 5. Hamilton, R.C., Clin. Chem., 33:1707 (1987). 6. Beck, C.S. and Heiner, D.C., Am. Rev. Respir. Dis., 124:94 (1981). 7. Klein, F et al., Clin. Chem. Acta., 150 119 (1985) 8. Vlug, A. et al., Ann. Biol. Clin. 52:561-67 (1994).

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