swant 235說明書(shu)  

產(chan) 品：抗小清蛋白單克隆抗體(ti)

代碼編號：235

批號：10-11(F)

表格：凍幹腹水（不含防腐劑）。

數量：200µl

複溶：用200µl重蒸餾水。

描述

單克隆抗小清蛋白是一種小鼠IgG1，由小鼠骨髓瘤細胞與(yu) 用純化自  鯉魚肌肉(1)。評價(jia) 抗體(ti) 的特異性和效價(jia) ：a）通過間接免疫熒光或免疫過氧化物酶標記以及4%多聚甲醛固定組織的冰凍切片機或振動切片機切片的抗生物素蛋白-生物素染色；b）通過免疫印跡的免疫酶標記；c）通過放射免疫測定法(RIA)(1)。

該產(chan) 品是一種抗小清蛋白的單克隆抗體(ti) (McAB)，小清蛋白是一種與(yu) 鈣調蛋白和肌鈣蛋白C相關(guan) 的EF手家族鈣結合蛋白。該抗體(ti) 與(yu) 人、猴、兔、大鼠組織中的小清蛋白發生特異性反應。  小鼠雞和魚。McAB在二維“免疫印跡”中特異性染色小清蛋白的45Ca結合點（MW 12'000和IEF 4.9）。在RIA設置中，McAB測量小清蛋白的靈敏度為(wei) 10 ng/檢測，親(qin) 和力為(wei) 7.9 x 1012 L/M(1)。

用途

鈣結合蛋白代表一個(ge) 小的酸性蛋白家族，配備有特殊的空腔，以高選擇性接受Ca2 +。鈣結合蛋白有兩(liang) 種類型，“觸發”和“緩衝(chong) ”蛋白。“觸發”型（例如鈣調蛋白和肌鈣蛋白C）通過改變結合Ca2 + 的形狀發揮作用。這種失真暴露了蛋白質表麵的區域，這些區域與(yu) 周圍的靶分子相互作用，改變了它們(men) 的活性。“緩衝(chong) 液”型的鈣結合蛋白被認為(wei) 是一個(ge) 負責控製細胞內(nei) Ca2 + 濃度的係統。小清蛋白主要存在於(yu) 神經細胞亞(ya) 群(2，4)和快肌纖維(3)中。它可能賦予這些細胞處理鈣離子的特殊技能。小清蛋白是一種有吸引力的神經解剖學工具，這種McAB保證了

持續產(chan) 生具有相同特異性和化學特性的恒定滴度的抗小清蛋白抗體(ti) 。

抗體性能

針對小清蛋白的McAB 235使用自由漂浮或安裝的大腦和肌肉部分（可能是所有脊椎動物的部分）特異性定位小清蛋白。固定似乎不妨礙抗原的檢測，因為(wei) 即使是2.5%戊二醛也與(yu) 半薄（0.5µm薄）冷凍切片上的免疫定位相容。  大鼠皮質(4)。可與(yu) 大鼠-小清蛋白作為(wei) 示蹤劑定量各種屬腦內(nei) 小清蛋白[1]。

免疫印跡

通過腦和肌肉提取物的免疫印跡可以確定抗體(ti) 235的特異性[1]。然而，該抗體(ti) 在SDS-凝膠電泳後不能很好地識別小清蛋白分子。

小清蛋白基因敲除小鼠的免疫組織化學

抗體(ti) 235免疫可高效標記正常大腦中的神經元亞(ya) 群（圖2a），但不會(hui) 染色小清蛋白基因敲除小鼠的大腦（圖2b）。

工作稀釋度

免疫組織化學：1:5'000-1:10'000

免疫印跡法：1:1’000。

我們(men) 建議通過滴定試驗確定宜稀釋度。

儲存條件

對於(yu) 長期儲(chu) 存，將1-2µl的小等份試樣保存在-80 ℃（或至少-20 ℃）下。連續使用時，稀釋溶液在4 ℃下保存（含0.01%疊氮化納）。避免反複凍融。

參考文獻

1. Celio M.R. et al.,Cell Calcium 9:81-86,1988
2. Celio M.R.,Heizmann C.W.(1981)Nature 293:300-302
3. Celio M.R.,Heizmann C.W.(1982)Nature 297:504-506 4. Celio M.R.(1986)Science 231:995-997

5. Schwaller B.等。(1999)Am.J.生理學。276.C395-403