spherotech SPHERO簡介

spherotech SPHERO簡介

羥基顆粒用於(yu) 促進免疫分析的發展，以及蛋白質、細胞或各種目標分析物的定量、分離、純化和表征。為(wei) 了提供羥基的好處，Spherotech提供SPHEROTM羥yi基（HEMA）/聚苯乙烯共聚物磁粉。這些共聚物顆粒提供親(qin) 水表麵，減少固定化蛋白質的變性。此外，羥yi基基團與(yu) 水溶液中的一層水形成氫鍵，防止顆粒聚集。這兩(liang) 個(ge) 特征轉化為(wei) 更長的配體(ti) 穩定性，更低的非特異性

結合電位，與(yu) 表麵疏水性更強的顆粒相比，具有更穩定的顆粒溶液。盡管羥基不會(hui) 自發地與(yu) 生物分子上的官能團發生反應，但它們(men) 可以通過許多已知的反應機製被激活進行共價(jia) 偶聯。該反應導致配體(ti) 的共價(jia) 連接，並且可以在水或非水條件下進行。通過利用非水條件，可防止活化劑和中間基團的水解。為(wei) 了促進與(yu) 羥yi基表麵的共軛，可以使用交聯劑在粒子和共價(jia) 偶聯的配體(ti) 之間形成間隔臂。各種交聯劑已成為(wei) *的工具

用於(yu) 製備用於(yu) 許多免疫分析、蛋白質分離和鑒定協議的包衣珠。常見和有效的交聯劑是異雙功能交聯劑，它具有兩(liang) 個(ge) 反應性基團。雜雙功能交聯劑在分子共軛過程中提供更好的控製和定向，以減少二聚體(ti) 和聚合物的生成。仔細選擇配體(ti) 、固定化化學和配體(ti) 密度將有助於(yu) 產(chan) 生適合特定應用所需生物活性的選擇性和靈敏度。

PMPI或對馬來酰亞(ya) 胺苯基異氰酸酯是一端帶有異氰酸酯基團，另一端帶有馬來酰亞(ya) 胺基團的異雙功能交聯劑。因此，它用於(yu) 促進硫化配體(ti) 與(yu) 配體(ti) 的共軛

羥yi基珠表麵。傳(chuan) 統上，PMPI用於(yu) 將硫化蛋白質或肽與(yu) 碳水化合物、類固醇或維生素1交聯。PMPI對水分非常敏感，需要在非水係統中溶解。信息技術

不能與(yu) 緩衝(chong) 液一起使用，但可溶於(yu) 甲苯和己烷，也可與(yu) 二氯甲烷反應。

在此，我們(men) 提出了一種方法，適用於(yu) 使用PMPI將巰基化配體(ti) 交聯到球形羥yi基（HEMA）/聚苯乙烯共聚物磁粉上。

其他方便的活化方法使用化合物在羥基顆粒上形成活性羰基

如羧基二咪唑（CDI）或碳酸二丁二酰亞(ya) 胺（DSC）。這些活化劑生成咪唑氨基甲酸酯（CDI）或NHS碳酸鹽（使用DSC），然後它們(men) 會(hui) 自發地與(yu) 胺反應。在裏麵

在CDI的情況下，咪唑氨基甲酸酯也會(hui) 自發地與(yu) 巰基發生反應。由於(yu) 這些活化試劑的任何部分都不會(hui) 成為(wei) 共軛分子和羥基珠之間最終鍵的一部分，

它們(men) 被認為(wei) 是零長度交聯劑（2,3）。本文描述了使用CDI和DSC的詳細耦合協議。然而，Spherotech建議優(you) 化質量試劑和偶聯條件，因為(wei) 兩(liang) 者都會(hui) 影響配體(ti) 與(yu) 功能化珠表麵偶聯的質量

材料：

1.HEMA-300-10（HEMA/聚苯乙烯共聚物磁粉，1%w/v，25-37μm，10 mL）

2.對馬來酰亞(ya) 胺苯基異氰酸酯（PMPI）

3.磷酸鹽緩衝(chong) 鹽水，0.1M，pH值7.4（PBS）

4.二甲基亞(ya) 碸（DMSO）

5.乙腈

6.具有巰基（–SH）反應性化學基團的化合物