cambcollabs三螺旋肽簡介

cambcollabs三螺旋肽簡介

CambCol實驗室合成膠原樣三螺旋肽用於(yu) 研究用途。它們(men) 有不同的結構形式，用於(yu) 不同的目的，但它們(men) 的關(guan) 鍵共同特征是[GXX']n基序，這是

三螺旋組件。我們(men) 的大多數肽含有GPP或GPO重複序列（Gly-Pro-Pro或Gly-Pro-Hyp）。

這些富含亞(ya) 氨基酸的序列形成穩定的三螺旋結構，在高於(yu) 37°C（通常為(wei) 45-50°C）的溫度下熔化（展開）[1,2]。我們(men) 製造以GPP或GPO重複序列為(wei) 主要成分的肽，

它保持三螺旋結構，以及另一個(ge) 序列（例如結合整合素的GFOGER基序）作為(wei) 客體(ti) 序列插入GPP或GPO宿主序列框架的肽[3]。在很多情況下，

在N端和C端都包含含有Cys的三聯體(ti) ，以允許出於(yu) 特定目的交聯Cys殘基巰基[4]。這是我們(men) 受體(ti) 特異性肽的常見形式。

為(wei) 您的特定應用格式化的肽：

•對於(yu) 蛋白質或細胞結合分析的表麵塗層，含半胱氨酸的肽可能是好的。自發形成的二硫化物可能會(hui) 導致肽的低聚合物的存在，其中協同結合會(hui) 促進表麵吸附[5]。在我們(men) 手中，用於(yu) 蛋白質結合研究的96孔板在這種情況下工作良好。

例如i-II-28，GPC[GPP]5GPP霧劑[GPP]5GPC酰胺

•如果肽僅(jin) 在溶液中使用，那麽(me) 不含Cys的三聯體(ti) 宿主序列可能是好的，因為(wei) 不會(hui) 發生自發氧化聚合[5]。競爭(zheng) 結合分析中使用的此類肽[4,6]，

例如，它將產(chan) 生更簡單的結合動力學。

例如Si-II-28、[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•使用肽製備蛋白質-肽複合物用於(yu) 結構研究，最小化肽的長度可能是有用的。在這種情況下，[GPO]3宿主序列允許相對較短但同樣穩定的肽

待生產(chan) （Tm）≥ 20攝氏度[7]。N-末端的乙酰化通過消除鏈間電荷排斥提高穩定性。這種策略可能適用於(yu) 使用4°C結晶條件的晶體(ti) 學研究，但較長的肽、[GPO]4宿主將為(wei) 室溫結晶提供更高的熱穩定性。

例如Ci-II-28、[GPO]2霧劑[GPO]3-酰胺

•衍生肽，例如含有熒光素或其他熒光團，或含有生物素，可用於(yu) 細胞表麵標記研究。

例如Fi-II-28，FITC-[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•膠原工具包，包含膠原II、膠原III或膠原XIII COL結構域全序列的重疊三螺旋肽庫，可用於(yu) 將膠原結合蛋白映射到

這些膠原蛋白的主要序列[2,8,9]。我們(men) 可以提供預先塗在96孔板上的工具包，或者我們(men) 可以在實驗室與(yu) 您合作，繪製目標蛋白質的結合位點。

一個(ge) 例子是II-28，GPC[GPP]5geagaoglvgprgergfogersogaq[GPP]5GPC酰胺

如果你的配體(ti) 結合位點已知，可以提供單獨的工具包肽，我們(men) 將與(yu) 你合作，在未知的地方更緊密地定義(yi) 結合位點。CambCol Laboratories已經接管了美國劍橋法恩代爾實驗室collagentoolkit網站的權益。

搬運和儲(chu) 存

肽粉

•在-20°C（零下20°C）下儲(chu) 存，粉末肽將無限期保存。我們(men) 提供了所提供肽的準確重量（通常為(wei) 1.1毫克），您應在0.01M醋酸中溶解至至少2.5毫克/毫升。

在4°C下儲(chu) 存一晚，以便在使用前形成完整的三螺旋。你可以等分，比如說20µl的批次，快速冷凍，並根據你的喜好在-20°C（零下20°C）或-80°C（零下80°C）下儲(chu) 存。

•您的工作庫存小份可在+4°C（+4°C）下儲(chu) 存，以便立即使用（最多4周）。避免長時間儲(chu) 存稀釋溶液（<1 mg/ml），否則肽可能會(hui) 因吸附到管壁或在非常稀釋的溶液中展開三螺旋而丟(diu) 失。

•避免多次重新冷凍和解凍，因為(wei) 這可能會(hui) 導致肽沉澱。如果你能在溶液中看到顆粒物質（肽聚集體(ti) ），*旋渦（2分鍾）以分散它們(men) 。

或者，你可以用超聲波檢查，注意不要讓管子過熱。CRP-XL以溶液形式提供

•我們(men) 可以提供CRP-XL作為(wei) 粉末，按上述方式處理，或作為(wei) 冷凍溶液≥ 在0.01M醋酸中加入2.5mg/ml。你可以解凍、等分、速凍，並將等分保存幾個(ge) 月。解凍時，檢查

可見聚集體(ti) 的存在。如果存在，通過上述大範圍渦流和/或超聲波分散。

•不要加熱CRP-XL懸浮液（一些方案要求對非交聯肽進行熱變性，以恢複單鏈狀態，然後通過冷卻重新折疊）。我們(men) 認為(wei) 這一過程將是有害的

對於(yu) CRP-XL，由於(yu) 變性但交聯的肽不太可能準確地重新折疊。