​dld-diagnostika EA611/96說明書

dld-diagnostika EA611/96說明書(shu)

Calretinin ELISA

酶免疫法定量測定血漿和血清中鈣視網膜蛋白

1.試驗的介紹和原理

一段時間以來，世界上超過55個(ge) 國家禁止生產(chan) 和使用石棉。然而，石棉相關(guan) 癌症——主要是惡性肺癌和間皮瘤——的數量仍然很高。

由於(yu) 這種疾病的潛伏期很長，而且一些國家正在生產(chan) 和應用石棉，預計不會(hui) 有實質性的改善。早期發現腫瘤——最好是在沒有臨(lin) 床症狀的階段——可能會(hui) 提高治愈治療的機會(hui) 。DLD Diagnostika GmbH與(yu) 德國社會(hui) 意外保險預防和職業(ye) 醫學研究所（波鴻魯爾大學（IPA）的科學家合作，開發了一種有前途的方法，該方法基於(yu) 鈣視網膜蛋白作為(wei) 血漿和血清樣本中早期檢測（尤其是間皮瘤）的生物標記物。目前，鈣視網膜蛋白是檢測間皮瘤的最佳標記物之一。

calretinin ELISA是一種利用純化兔多克隆抗體(ti) 的夾心酶免疫分析法。在培養(yang) 過程中，稀釋患者樣本中的鈣視網膜蛋白與(yu) 固定在微量滴定板孔表麵的鈣視網膜蛋白抗體(ti) （捕獲抗體(ti) ）結合。清洗步驟後，添加生物素化鈣視網膜蛋白抗體(ti) （檢測抗體(ti) ），該抗體(ti) 與(yu) 患者樣本中捕獲的鈣視網膜蛋白結合。在第二個(ge) 洗滌步驟後，加入共軛鏈黴親(qin) 和素過氧化物酶，與(yu) 生物素化檢測抗體(ti) 特異性結合。第三步洗滌後，酶的結合量——相當於(yu) 鈣視網膜蛋白的量——通過底物四甲基本甲啶（TMB）的周轉進行量化。

在酶反應過程中，會(hui) 產(chan) 生藍色染料。加入硫酸會(hui) 停止反應，使溶液變黃。使用微量滴定板讀取器在450 nm（參考波長在570 nm和650 nm之間）下測量樣品的消光度，並使用分析的標準品和對照品計算鈣視網膜蛋白的濃度。

2.注意事項

 僅(jin) 供體(ti) 外使用。

 應使用一次性手套和安全眼鏡。

 本試劑盒中使用的所有人類來源試劑均經過HIV I/II抗體(ti) 、HCV和HBsAg檢測，結果為(wei) 陰性。然而，由於(yu) 沒有任何測試方法可以*保證不存在傳(chuan) 染源，因此這些試劑應作為(wei) 潛在的生物危險物質處理。

 用於(yu) 製備試劑盒的動物源性材料來自經認證的健康動物，但這些材料應被視為(wei) 具有潛在傳(chuan) 染性。

 該試劑盒的某些組件含有危險試劑。這些部件標有適當的危險標簽。

3.儲(chu) 存和穩定性

到達後，將試劑盒儲(chu) 存在2-8°C的溫度下。一旦打開試劑盒，試劑盒將保持穩定，直至到期。有關(guan) 製備試劑的穩定性，請參閱試劑的製備。不要使用超過套件標簽上顯示的有效期的組件。不要在單個(ge) 分析中混合不同批次的任何試劑盒成分。

需要但未提供的其他材料和設備：

 移液管15、50、60和100µl

 軌道振動篩

 多通道移液管或微孔板清洗裝置

 Eppendorf Multipette（或類似設備）

 微孔板光度計（450 nm）

 離心機（2500克）

 蒸餾水

5.樣本收集和儲(chu) 存

可使用EDTA血漿和血清進行檢測。

EDTA血漿和血清

應使用EDTA血漿和血清。溶血和血脂樣本

不應使用。

樣品可在2-8°C下儲(chu) 存12小時。對於(yu) 更長的儲(chu) 存時間（最多24個(ge) 月），樣品必須在-20°C下冷凍。應避免重複冷凍和解凍樣品。